[发明专利]一种基于CRISPR/Cas9技术的Ahnak2基因敲除动物模型的构建方法在审
申请号: | 202110411363.4 | 申请日: | 2021-04-16 |
公开(公告)号: | CN113088521A | 公开(公告)日: | 2021-07-09 |
发明(设计)人: | 丁克越;唐霞 | 申请(专利权)人: | 河南省人民医院 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/55;C12N15/85;C12N15/89;A01K67/027;A01K67/02 |
代理公司: | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人: | 宫建华 |
地址: | 450000 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明属于生物工程领域,涉及一种基于CRISPR/Cas9技术的Ahnak2基因敲除动物模型的构建方法,包括靶向小鼠Ahnak2基因的sgRNA载体构建、sgRNA的体外转录、F0代小鼠获取及鉴定、F1代杂合小鼠获取及鉴定、纯合后代的获取等过程构建Ahnak2基因敲除动物模型,所构建的动物模型,解决了传统基因敲除技术中基因脱靶率高、动物成活率低的问题,通过筛选更为高效的靶向小鼠Ahnak2基因的sgRNA载体,并对进一步降低脱靶率,提高小鼠后代阳性率及模型构建的成功率,经过6代纯合自交依然能够获得纯合后代,使得本发明方法构建的动物模型具有良好的稳定性,在心脏病、结直肠癌、子宫癌等肿瘤机理研究及药物开发领域具有重要应用价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 crispr cas9 技术 ahnak2 基因 动物 模型 构建 方法 | ||
【主权项】:
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