[发明专利]一种用于大片段DNA无缝组装的系统及组装方法有效

专利信息
申请号: 202010042733.7 申请日: 2020-01-15
公开(公告)号: CN112852849B 公开(公告)日: 2023-03-14
发明(设计)人: 李阳;易良华 申请(专利权)人: 湖北伯远合成生物科技有限公司
主分类号: C12N15/63 分类号: C12N15/63;C12N15/66
代理公司: 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 代理人: 徐瑛
地址: 438000 湖北省黄*** 国省代码: 湖北;42
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摘要: 发明属于分子生物学技术领域,具体涉及一种用于大片段DNA无缝组装的系统及组装方法,包括:S1、构建载体系统;S2、将大片段DNA分成多个目标片段,并将目标片段按顺序交替克隆到供给载体D1、D2上;S3、用EN1同时酶切接受载体A和酶切供给载体D1‑seg1,通过组装反应得到pBWRA‑seg1,然后采用EN2酶切pBWRA‑seg1和供给载体D2‑seg2,通过组装反应得到pBWRA‑seg1‑seg2;S4、重复步骤S3,根据确定的组装顺序将目标片段分步组装连接到接受载体A上,形成最终的载体。本发明的核酸内切酶在转基因载体构建、合成生物学、代谢通路研究等方面具有良好应用前景。
搜索关键词: 一种 用于 片段 dna 无缝 组装 系统 方法
【主权项】:
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