[发明专利]百香果叶片植株再生快繁技术

摘要

本发明涉及百香果组织培养技术领域，且公开了百香果叶片植株再生快繁技术，包括以下步骤：1)外植体选择，在晴天选择生长健壮、长势良好、无病虫害的紫果百香果实及3‑4cm长嫩枝茎尖，将果实放在自来水下冲洗，并用肥皂水刷洗果实表面，应注意果实表面不能破损。该百香果叶片植株再生快繁技术，通过进行试验对比，百香果种子无菌实生苗的子叶、真叶以及田间茎尖嫩叶为繁殖材料，研究叶片植株再生快繁方法，试验结果表明，实生苗的子叶、真叶经诱导培养都能产生愈伤组织，特别是子叶，愈伤组织分化早、生长快、愈伤组织诱导率可达100％，并在产生愈伤的同时可直接分化不定芽丛，其次为真叶，茎尖上嫩叶没有成功。

主权项

1.百香果叶片植株再生快繁技术，其特征在于，包括以下步骤：/n1)外植体选择，在晴天选择生长健壮、长势良好、无病虫害的紫果百香果实及3-4cm长嫩枝茎尖，将果实放在自来水下冲洗，并用肥皂水刷洗果实表面，清洗干净后，在无菌工作台内，用75％酒精反复擦拭果实表皮4-5次备用，剪除茎尖不要的老叶，用自来水反复冲洗，再用肥皂水清洗，清洗干净后，在无菌工作台内，先用75％酒精浸泡30s，再用0.1％的氯化汞溶液浸泡10min,然后用无菌水冲洗4-5次，再用无菌滤纸吸干表面水分，备用。/n2)将经无菌处理的果实从中部切开，挑选个大，饱满的种子直接接种到经灭菌的装有细沙，的培养瓶中，经35-40天的培养，可得到高度为4-5cm的实生苗。/n3)将经无菌培养得到的实生苗按子叶、真叶部位切割，田间茎尖直接将未完全展开的嫩叶切割下来，分別接种到1-8号处理的培养基中，35d统计出愈率及不定芽分化情况，每处理接种5瓶，每瓶接一块，三次重复。/n4)将经愈伤组织诱导培养得到的愈伤组织或芽丛，切割为0.5c㎡左右的小块，接种到9-14号处理的培养基中，25d统计不定芽的分化率及分化情况，每处理接种5瓶，每瓶接种工一块，三次重复。/n5)将经丛生芽诱导培养得到的芽或芽丛，分割为含2-3个茎节的茎段接种到15-22号处理的培养基中，25d统计芽的分化率及生长情况，每处理3瓶，每瓶接种1株，三次重复。/n6)将得到的芽或芽丛，切割为含2-3节的茎尖，接种到23-27号处理的生根培养基中，25d统计生根率及根系生长情况，每处理5瓶，每瓶接种5株，三次重复。/n7)以Ms为基本培养基，附加蔗糖30g/L，琼脂5g/L,pH值5.8-6.0，培养室温度为25±2℃，光照强度为1600-2000Lx，光照时间为12h/d。/n8)采用spss统计分析软件进行方差分析和多重比较。/n