[发明专利]百香果叶片植株再生快繁技术

说明书

本发明涉及百香果组织培养技术领域，且公开了百香果叶片植株再生快繁技术，包括以下步骤：1)外植体选择，在晴天选择生长健壮、长势良好、无病虫害的紫果百香果实及3‑4cm长嫩枝茎尖，将果实放在自来水下冲洗，并用肥皂水刷洗果实表面，应注意果实表面不能破损。该百香果叶片植株再生快繁技术，通过进行试验对比，百香果种子无菌实生苗的子叶、真叶以及田间茎尖嫩叶为繁殖材料，研究叶片植株再生快繁方法，试验结果表明，实生苗的子叶、真叶经诱导培养都能产生愈伤组织，特别是子叶，愈伤组织分化早、生长快、愈伤组织诱导率可达100％，并在产生愈伤的同时可直接分化不定芽丛，其次为真叶，茎尖上嫩叶没有成功。

技术领域

本发明涉及百香果织组培养技术领域，具体为一种百香果叶片植株再生快繁技术。

背景技术

百香果又名鸡蛋果，西蕃莲，洋石榴，属西蕃莲科西蕃莲属的滕本植物, 为热带亚热带多年生植物，果实富含人体所需的17种氨基酸、多种维生素、类胡萝卜素和微量元素，营养价值极高，可溶性固形物5-16％，总酸量 3.8-4.0％，甜酸适中，素有“果汁之王”的美誉，其根茎、叶可入药，具有消炎、止痛、活血和強身等功效。

近年来，随着人们对百香果认识的提高，百香果的综合开发利用和高产栽培技术已有很多的研究，种植面积逐年加大，主要集中种植于广西、广东、云南、海南和福建等地，市场对种苗的需求越来越大，目前种苗的繁殖方式主要有三种：一是用种子播种繁殖；二是用滕蔓扦插繁殖；三是用接穂嫁接繁殖，种子繁殖，浪费果实，生长周期长、用工量大；扦插繁殖，需要大量滕蔓、易传播病害、加快品种退化；嫁接繁殖、种苗质量好但占地面积大、成苗周期长、种苗价格高，三种繁殖方法均存在占地、耗时、周期长、生长成本高、受季节、环境和天气影响等情况，同时还会加剧病害传播，因此，应用植物组织培养技术，建立百香果快速无性繁殖体系，是产业化、规范化生产优质种苗最有效的途径，本试验以百香果种子无菌实生苗的子叶、真叶以及田间枝条茎尖嫩叶为外植体，开展百香果组培快繁技术研究、旨在为百香果组培苗生产提供一种方法。

发明内容

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种百香果叶片植株再生快繁技术，具备生长周期短，不受环境和天气影响，生长成本低等优点，解决了三种繁殖方法均存在占地、耗时、周期长、生长成本高、受季节、环境和天气影响等情况，同时还会加剧病害传播的问题。

(二)技术方案

为实现上述生长周期短，不受环境和天气影响，生长成本低目的，本发明提供如下技术方案：

百香果叶片植株再生快繁技术，包括以下步骤：

1)外植体选择，在晴天选择生长健壮、长势良好、无病虫害的紫果百香果实及3-4cm长茎尖，将果实放在自来水下冲洗，并用肥皂水刷洗果实表面，清洗干净后，在无菌工作台内，用75％酒精反复擦拭果实表皮4-5次备用，剪除茎尖不要的老叶，用自来水反复冲洗，再用肥皂水清洗，清洗干净后，在无菌工作台内，先用75％酒精浸泡30s，再用0.1％的氯化汞溶液浸泡10min, 然后用无菌水冲洗4-5次，再用无菌滤纸吸干表面水分，备用。

2)将经无菌处理的果实从中部切开，挑选个大，饱满的种子直接接种到经灭菌的装有细沙，的培养瓶中，经35-40天的培养，可得到高度为4-5cm 的实生苗。

3)将经无菌培养得到的实生苗按子叶、真叶部位切割，田间茎尖直接将未完全展开的嫩叶切割下来，分別接种到1-8号处理的培养基中，35d统计出愈率及不定芽分化情况，每处理接种5瓶，每瓶接一块，三次重复。

4)将经愈伤组织诱导培养得到的愈伤组织或芽丛，切割为0.5c㎡左右的小块，接种到9-14号处理的培养基中，25d统计不定芽的分化率及分化情况，每处理接种5瓶，每瓶接种工一块，三次重复。