[发明专利]猪传染性胃肠炎病毒PLA检测试剂盒有效
| 申请号: | 201910961479.8 | 申请日: | 2019-10-11 |
| 公开(公告)号: | CN110607402B | 公开(公告)日: | 2023-01-03 |
| 发明(设计)人: | 金文杰;王艳春;汪怿旸;宁晨;钟蕾;秦爱建;刘金彪 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;G01N33/577 |
| 代理公司: | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人: | 卢亚丽 |
| 地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | 本发明涉及一种猪传染性胃肠炎病毒PLA检测试剂盒。所述试剂盒包括(1)两株生物素标记的抗体:抗TGEV抗体1A2、抗TGEV抗体2B1;(2)探针;(3)连接液;(4)PCR mix:Universal PCR Assay、2×Fast Master Mix。将两株生物素标记的针对猪传染性胃肠炎病毒SA蛋白的特异性单克隆抗体稀释到工作浓度、与探针孵育进行连接,最后采用实时定量PCR扩增目的单链DNA,成功检测到猪传染性胃肠炎病毒。本发明解决了现有技术时间长、工作量大、灵敏度低、非特异性、操作复杂等缺陷;具有不涉及放射性物质,试剂与样品消耗量小,灵敏度高,无需特殊设备,操作简单的优点。 | ||
| 搜索关键词: | 传染性 胃肠炎 病毒 pla 检测 试剂盒 | ||
【主权项】:
1.一种猪传染性胃肠炎病毒PLA检测试剂盒,包括以下成分:/n(1)生物素标记的抗体:生物素标记抗TGEV抗体1A2、生物素标记抗TGEV抗体2B1;所述抗TGEV抗体1A2是由分泌抗猪传染性胃肠炎病毒单克隆抗体细胞株TGEV-SA-1A2-(1-10)CGMCC No.18315分泌;所述抗TGEV抗体2B1是由分泌抗猪传染性胃肠炎病毒单克隆抗体细胞株TGEV-SA-2B1-(1-10)CGMCC No.18314分泌;/n(2)探针:200nM 3’Prox-Oligo、200nM 5’Prox-Oligo、探针稀释缓冲液、抗体稀释缓冲液;/n(3)连接液:500×DNA连接酶、1×连接酶稀释缓冲液、20×连接反应缓冲液;/n(4)PCR mix:Universal PCR Assay、2×Fast Master Mix。/n
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