[发明专利]一种具有修复作用的安康鱼肉多肽的制备及应用

摘要

本发明涉及生物技术提取领域，针对现有技术的发明物分子活性不足及药物修复成分针对性较弱的问题，公开了一种具有修复作用的安康鱼肉多肽的制备及应用，包括以下步骤：安康鱼肉预处理；酶解；过滤得澄清液；分离纯化；除杂除菌；多肽分级。提供一种对非酒精性脂肪肝具有修复作用的安康鱼肉多肽的提取工艺及应用效果，可明显降低非酒精性脂肪肝模型（NAFLD）血清中ALT和AST活性；安康鱼肉多肽提取率高、提取纯度高，对NAFLD具有优良的修复作用，生物活性稳定，可保持时间较长；能有针对性的对非酒精性脂肪肝进行修复，修复效果较好并且该提取工艺的可控性好，易于实际大规模工业化量产。

主权项

1.一种具有修复作用的安康鱼肉多肽的制备，其特征是，包括以下步骤：/n（1）、安康鱼肉预处理：将安康鱼进行解冻清洗后绞碎，在料液比为1:4-6 (m/v)，温度为48-52℃的条件下，用94-96%的乙醇水浴脱脂2-2.2h；脱脂后将上清液倒掉，用纯水将沉淀洗净，将脱脂鱼肉在2-6 ℃、11900-12000 r/min 条件下离心15-20 min，收集沉淀，放入-18—-20 ℃冷冻备用；/n（2）、酶解：将鱼肉加到含有中性蛋白酶的酶解液中进行酶解；其中，中性蛋白酶的浓度为0.05-0.25wt%，酶解液质量为鱼肉质量的2-4倍，酶解温度为30-45℃，酶解液pH至控制在6.5-8.5，酶解时间为5-5.4h；/n（3）、过滤得澄清液：向酶解液中添加质量为酶解液1-2wt%的改性活性炭，并将酶解液加热到70-80℃，脱色30-50min；将脱色后的酶解液转移至板框过滤池内进行过滤，取澄清液；/n（4）、分离纯化：将澄清液鼓气起泡，并收集泡沫液，在鼓气的同时注水；鼓气速率为3-4L/min，注水速率为0.2-0.3L/min，澄清液温度保持在25-35℃；待收集的泡沫液灭泡后，对泡沫液进行重金属分离；向重金属分离后的泡沫液中添加质量为泡沫液1-2%的磁性亲和微球并分散均匀，静置亲和吸附50-70min后利用磁场使磁性亲和微球聚集；分离出磁性亲和微球后，用pH值为7-7.2的Tris-HCl缓冲液对磁性亲和微球进行洗脱，再次利用磁场分离出磁性亲和微球后，得到洗脱液，75-85℃下储存备用；/n（5）、除杂除菌：将洗脱液通过二级0.22微米膜过滤除杂除菌；其中膜过滤温度小于45℃，一级过滤压力小于0.25MPa，二级过滤压力小于0.4MPa；/n（6）、多肽分级：采用超滤膜或纳滤膜对膜过滤后的浓缩液按分子量进行分离，得到目标分子量的安康鱼肉多肽。/n