[发明专利]一种甲基嘧啶磷单克隆抗体的制备及其应用在审
| 申请号： | 201910890291.9 | 申请日： | 2019-09-20 |
| 公开（公告）号： | CN110684110A | 公开（公告）日： | 2020-01-14 |
| 发明（设计）人： | 万宇平;吴小胜;朱亮亮;何方洋;王琳琛;王兆芹;崔娜 | 申请（专利权）人： | 北京勤邦生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/44 | 分类号： | C07K16/44;C07F9/6512;G01N33/58;G01N33/577;G01N33/558;G01N33/543 |
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| 地址： | 102206 北京市昌平*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种甲基嘧啶磷单克隆抗体的制备方法，并将其应用于甲基嘧啶磷残留检测试纸条和酶联免疫试剂盒。试纸条包括：样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)和底板(7)，所述反应膜上具有包被有甲基嘧啶磷半抗原‑载体蛋白偶联物的检测线(5)和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线(6)，所述结合物释放垫(2)喷涂有甲基嘧啶磷单克隆抗体‑胶体金标记物。试剂盒包括：包被有包被原的酶标板、甲基嘧啶磷标准品溶液、甲基嘧啶磷抗体、酶结合物浓缩液、酶结合物稀释液、底物显色液、终止液、洗涤液，所述包被原为甲基嘧啶磷偶联抗原，所述酶结合物为酶标记的甲基嘧啶磷抗体。本发明所提供的试纸条和酶联免疫试剂盒具有操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低等特点，适合大量样本的筛查和现场监控。 | ||
| 搜索关键词： | 甲基嘧啶磷 试纸条 包被 酶联免疫试剂盒 结合物释放垫 单克隆抗体 酶结合物 包被原 反应膜 抗体 酶结合物稀释液 载体蛋白偶联物 胶体金标记物 羊抗鼠抗抗体 底板 标准品溶液 底物显色液 样品吸收垫 残留检测 偶联抗原 现场监控 半抗原 检测线 灵敏度 酶标板 酶标记 浓缩液 试剂盒 吸水垫 洗涤液 质控线 终止液 喷涂 筛查 制备 样本 检测 应用 | ||
【主权项】：
1.一种甲基嘧啶磷单克隆抗体，其特征在于所述单克隆抗体由甲基嘧啶磷半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得，所述半抗原的制备方法为：取2.26g化合物Ⅰ，1,2-二氯乙烷150ml溶解,加二甲基硫代磷酰氯1.82g，三乙胺0.8ml,室温搅拌反应12h，停止反应，加水100ml，震荡萃取，分去水相，有机相蒸干，得到红色油状物，加甲醇70ml溶解，加钯碳0.4g，充分搅拌，抽取空气，通入氢气，室温搅拌4h，停止反应，过滤，除去钯碳，减压蒸干，得到粗产物，无水乙醇10ml重结晶，得到化合物Ⅲ0.9g，收率28.1％；化合物Ⅲ0.9g，加吡啶80ml溶解，加琥珀酸酐0.32g，油浴加热，80℃反应12h，停止反应，旋蒸除去吡啶，油状物上硅胶柱，二氯甲烷/甲醇体积比10:1洗脱分离，得到琥珀酸甲基嘧啶磷半抗原产物0.7g，收率59.32％。/n
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