[发明专利]应用数字PCR评价DNA聚合酶活性的方法在审
| 申请号： | 201910865761.6 | 申请日： | 2019-09-09 |
| 公开（公告）号： | CN110511981A | 公开（公告）日： | 2019-11-29 |
| 发明（设计）人： | 尹焕才;刘荻;田晶晶;袁通阔;唐玉国 | 申请（专利权）人： | 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 11369 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 韩飞<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
| 地址： | 215163 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种应用数字PCR评价DNA聚合酶活性的方法，包括：1)配制dPCR反应体系；2)进行dPCR反应，检测得到初始模板的含量；3)使用标准品代替步骤1)中的待测热启动taq酶样本，重复步骤1)‑步骤2)；4)待测热启动taq酶样本活性评价：待测热启动taq酶样本活性比＝使用待测热启动taq酶样本测得的初始模板含量/使用标准品测得的初始模板含量*100％。本发明的应用数字PCR评价DNA聚合酶活性的方法，利用数字PCR评价DNA聚合酶活性，无需标准曲线，即可对靶分子起始量进行绝对定量，结果更直观，便于酶活性的评价；能适合用于对酶活性较低的样品进行检测。 | ||
| 搜索关键词： | 热启动 样本 应用数字 标准品 酶活性 标准曲线 活性评价 数字PCR 活性比 起始量 检测 对靶 配制 直观 重复 | ||
【主权项】：
1.一种应用数字PCR评价DNA聚合酶活性的方法，其特征在于，包括：/n1)配制dPCR反应体系：/ndPCR反应体系包括：双蒸水、预混液、正向引物、反向引物、待测热启动taq酶样本以及模板；/n2)进行dPCR反应，检测得到初始模板的含量；/n3)使用标准品代替步骤1)中的待测热启动taq酶样本，重复步骤1)-步骤2)，得到初始模板的含量；/n4)待测热启动taq酶样本活性评价：/n待测热启动taq酶样本活性比＝使用待测热启动taq酶样本测得的初始模板含量/使用标准品测得的初始模板含量*100％。/n
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