[发明专利]一种形成新城疫病毒F蛋白融合前构象的多肽、核苷酸及构建方法和应用有效
| 申请号： | 201910819317.0 | 申请日： | 2019-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN110511270B | 公开（公告）日： | 2020-06-23 |
| 发明（设计）人： | 刘胜旺;孙军峰;韩宗玺 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心） |
| 主分类号： | C07K14/125 | 分类号： | C07K14/125;C12N15/45;C12N15/10;C12N7/01;A61K39/17;A61P31/14;C12R1/93 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 邓宇 |
| 地址： | 150030 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 一种形成新城疫病毒F蛋白融合前构象的多肽、核苷酸及构建方法和应用，涉及生物技术领域。针对新城疫病毒F蛋白融合前构象结构不稳定的问题以及融合前构象的多肽免疫效力未知的技术问题，本发明提供了一种形成新城疫病毒F蛋白融合前构象的多肽，以及能够编码新城疫病毒F蛋白融合前构象的核苷酸序列，构建获得了含有上述能够编码新城疫病毒F蛋白融合前构象的核苷酸序列的重组质粒，并通过蛋白表达系统获得了能够形成新城疫病毒F蛋白融合前构象的蛋白，本发明获得的能够编码新城疫病毒F蛋白融合前构象的核苷酸序列或多肽序列可作为免疫原制备用于预防新城疫的疫苗。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 形成 新城 疫病 蛋白 融合 构象 多肽 核苷酸 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种形成新城疫病毒F蛋白融合前构象的多肽，其特征在于，所述多肽为optiF-P1、optiF-P2、optiF-P3或optiF-P4；所述多肽序列optiF-P1是在亲本新城疫病毒F蛋白的氨基酸序列中引入16V-16I,24G-24S,28S-28L,71R-71K,78K-78R,146K-146Q,154L-154I,402T-402A,480K-480R,489E-489D共10个突变位点，缺失了第500～553位氨基酸残基区域的跨膜区和胞质尾，在此缺失位置依次加入Fibritin三聚体结构基序以及His标签和Strep标签；/n所述的多肽序列optiF-P2是在亲本新城疫病毒F蛋白的氨基酸序列中引入16V-16I,24G-24S,28S-28L,71R-71K,78K-78R,146K-146Q,154L-154I,402T-402A,480K-480R,489E-489D共10个突变位点，将第112～117位裂解位点处的氨基酸残基RRQKRF突变为了GGQGRF，缺失了500～553位氨基酸残基区域的跨膜区和胞质尾，在此缺失位置依次加入Fibritin三聚体结构基序以及His标签和Strep标签；/n所述的多肽序列optiF-P3是在亲本新城疫病毒F蛋白的氨基酸序列中引入16V-16I,24G-24S,28S-28L,71R-71K,78K-78R,146K-146Q,154L-154I,402T-402A,480K-480R,489E-489D共10个突变位点；/n所述的多肽序列optiF-P4在亲本新城疫病毒F蛋白的氨基酸序列中引入16V-16I,24G-24S,28S-28L,71R-71K,78K-78R,146K-146Q,154L-154I,402T-402A,480K-480R,489E-489D共10个突变位点，将第112～117位氨基酸残基RRQKRF突变为GGQGRF；/n所述亲本新城疫病毒F蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述Fibritin三聚体结构基序的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；所述His标签的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；所述Strep标签的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。/n
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心），未经中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心）许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910819317.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 同类专利
- 一种重组新城疫病毒基质蛋白及其应用-202110571930.2
- 仇旭升;丁铲;孟春春;谭磊;孙英杰;于圣青;刘炜玮;宋翠萍;廖瑛 - 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
- 2021-05-25 - 2023-03-03 - C07K14/125
- 本发明提供了一种重组新城疫病毒基质蛋白及其应用，所述重组新城疫病毒基质蛋白为发生了R247K和/或S263R突变的基质蛋白；所述新城疫病毒为新城疫病毒疫苗株La Sota株。本发明还提供了一种核酸分子、一种重组载体、一种重组细胞、一种重组新城疫病毒及其制备方法以及一种新城疫病毒疫苗。所述重组新城疫病毒基质蛋白具有更好的核质穿梭效率、更强的出胞能力及更快的出芽速度，可以促进新城疫病毒的增殖与释放；含有重组基质蛋白的重组新城疫病毒具有更高的滴度和更快的增殖速度，且依然保持弱毒毒力，对于疫苗的研发与改进具有重要的意义。
- 新城疫病毒疫苗-202110688503.2
- 贺笋;李俊辉;潘毅平;张伟;程兰玲;潘晓梅;毛丽萍;王雨朦 - 天康制药（苏州）有限公司
- 2021-06-23 - 2022-05-31 - C07K14/125
- 本发明涉及生物技术领域，具体而言，提供了一种新城疫病毒疫苗。制备新城疫病毒疫苗的蛋白，包括新城疫病毒的F蛋白和新城疫病毒的HN蛋白，其中，编码F蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1(基因Ⅶ型)或SEQID NO.3(基因Ⅱ型)所示，编码HN蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.2(基因Ⅱ型)或SEQ ID NO.4(基因Ⅶ型)所示。该蛋白适用于真核细胞表达系统，简化了新城疫病毒疫苗活性成分制备的工艺，同时降低了成本。并且，该蛋白具有广谱抗原性，可以实现良好的交叉保护效果。
- 检测新城疫病毒抗体的多肽及其ELISA检测试剂盒-201910496410.2
- 张安定;成泽;任海洋 - 华中农业大学
- 2019-06-10 - 2022-04-22 - C07K14/125
- 本发明公开一种检测新城疫病毒抗体的多肽及其ELISA检测试剂盒，该试剂盒通过筛选的新城疫病毒HN蛋白的多肽包被酶标板，通过检测样品中血清抗体与多肽的结合能力，借助于辣根过氧化物酶标记的羊抗鸡Igγ的抗体，来检测血清中新城疫病毒抗体水平。该试剂盒检测禽流感病毒H5、H7、H9亚型抗体、鸡传染性法氏囊病病毒抗体、鸡传染性支气管炎病毒抗体均为阴性。该试剂盒可检测血凝抑制(HI)效价大于或等于4log
- 一种禽传染性支气管炎和新城疫的病毒样颗粒、制备方法及应用-201811348712.7
- 王红宁;杨鑫;吴暄;左磊;袁齐武;李豪 - 四川大学
- 2018-11-13 - 2021-09-28 - C07K14/125
- 本发明属于生物技术和疫苗制备技术领域，公开了一种禽传染性支气管炎和新城疫的病毒样颗粒，所述病毒样颗粒由rS、rF和IBV M基因分别转入杆状病毒表达系统，再将分别包含rS、rF和M基因的杆状病毒表达系统转入昆虫细胞内组装而成，所述rS基因由IBV S1基因和IBV S‑TM/CT基因连接而成，所述rF基因由NDV Fecto基因和IBV S‑TM/CT基因连接而成。本发明还公开了该病毒样颗粒的制备方法和应用。本发明的优点在于，该病毒颗粒克服了以往IB和ND疫苗免疫力低下、不能有效保护禽类的缺陷。本发明提供的病毒样颗粒的制备方法简单易操作，稳定性好，便于推广。
- 新城疫病毒基质蛋白的抗原表位、抗体、鉴定方法和应用-201810590651.9
- 萧飒;毕友坤;杨增岐;陈鸿军;王文彬;金忠元 - 西北农林科技大学
- 2018-06-09 - 2021-03-30 - C07K14/125
- 本发明公开了一种新城疫病毒基质(Matrix，M)蛋白的抗原表位、抗体、鉴定方法和应用，涉及生物学技术领域。本发明提供的新城疫病毒基质蛋白的抗原表位的序列1为
- 一种形成新城疫病毒F蛋白融合前构象的多肽、核苷酸及构建方法和应用-201910819317.0
- 刘胜旺;孙军峰;韩宗玺 - 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心）
- 2019-08-31 - 2020-06-23 - C07K14/125
- 一种形成新城疫病毒F蛋白融合前构象的多肽、核苷酸及构建方法和应用，涉及生物技术领域。针对新城疫病毒F蛋白融合前构象结构不稳定的问题以及融合前构象的多肽免疫效力未知的技术问题，本发明提供了一种形成新城疫病毒F蛋白融合前构象的多肽，以及能够编码新城疫病毒F蛋白融合前构象的核苷酸序列，构建获得了含有上述能够编码新城疫病毒F蛋白融合前构象的核苷酸序列的重组质粒，并通过蛋白表达系统获得了能够形成新城疫病毒F蛋白融合前构象的蛋白，本发明获得的能够编码新城疫病毒F蛋白融合前构象的核苷酸序列或多肽序列可作为免疫原制备用于预防新城疫的疫苗。
- 一种规模化生产胚毒类抗原的净化方法-202010094926.7
- 韩建文;夏娜;唐振;李龙;朱艳梅;丁欣;李晓林;丁财辉;于国营;杜元钊 - 青岛易邦生物工程有限公司
- 2020-02-17 - 2020-06-19 - C07K14/125
- 本发明提供了一种规模化生产的胚毒类抗原的纯化方法，能够对灭活抗原液中残存的变性杂蛋白进行彻底清除，进一步提高疫苗的安全性。本发明的方法，首先将胚毒类灭活抗原由甲醛灭活时的温度进行降温操作；再将降温的灭活抗原进行静置，然后将静置后的灭活抗原以13000g～16000g离心力高速离心，获得的上清液为纯化的胚毒类抗原。本发明的方法使残存的杂蛋白先通过变温致杂蛋白变性析出，再借助离心的方法，去除杂蛋白的同时，保持目的抗原的完整结构。
- 新城疫病毒抗体检测试剂盒-201810507579.9
- 马雄明;章为江 - 苏州工业园区强东医药科技有限公司;苏州优迪生物科技有限公司
- 2018-05-24 - 2020-05-01 - C07K14/125
- 本发明涉及新城疫病毒抗体检测试剂盒。本发明的检测试剂盒包括一个或多个固体载体，以及独立地连接于所述一个或多个固体载体上的特定多肽或多肽组合。
- 新城疫病毒HN蛋白119位氨基酸突变体的构建-201610984363.2
- 袁小远;王友令;张玉霞;杨金兴;金维江;于可响;宋敏训 - 山东省农业科学院家禽研究所
- 2016-11-09 - 2017-04-19 - C07K14/125
- 本发明属于蛋白质工程领域，尤其涉及新城疫病毒HN蛋白119位氨基酸突变体的构建。一种新城疫病毒HN蛋白突变体其特征在于该突变体是采用定点突变的方法以新城疫病毒为模板，将HN蛋白糖基化位点第119位氨基酸由AAT被定点突变为CAG，经大肠杆菌感受态细胞HST08株表达，提取阳性质粒，得到新城疫病毒HN蛋白119位氨基酸突变体。研究该突变体有助于研究此处糖基化位点突变对病毒表达、蛋白的空间结构、病毒活性的影响，并可判断病毒的复制性和致病性是否发生改变。
- 一种对抗新城疫病毒感染的长效多肽及其修饰物-201210170743.4
- 王晓佳 - 中国农业大学
- 2012-05-29 - 2013-12-18 - C07K14/125
- 本发明公开了一种抗新城疫病毒感染的多肽及其修饰物。所述多肽的氨基酸序列为序列表中序列1；所述修饰物为用胆固醇对所述多肽氨基末端进行修饰所得的产物；所述修饰为在序列表中序列1的第一个氨基酸上连接所述胆固醇。本发明所提供的多肽修饰物可高效地抑制病毒入侵宿主细胞，在抗病毒活性方面效果明显（细胞水平为12nM单位，鸡胚水平为0.1mg单位，鸡活体水平为0.5mg单位），且在新城疫病毒感染前2天至2天后肌肉注射，皆可有效抵御这种可入侵禽类血脑屏障的高致病性病毒感染。本发明为多肽类制剂的应用提供了重要依据，在动物医学领域具有重要的应用前景和创新意义。
- 新城疫病毒Italien株HN蛋白和F蛋白及其在基因治疗药物中的应用-200910022455.2
- 边惠洁;陈志南;尉丁;冯浩 - 中国人民解放军第四军医大学
- 2009-05-12 - 2010-07-07 - C07K14/125
- 本发明涉及一种新城疫病毒Italien株HN蛋白和F蛋白及其在基因治疗药物中的应用，包括NDV Italien株的HN基因和F基因的cDNA以及NDV Italien株的HN蛋白和F蛋白氨基酸序列。本发明的有益效果是：得到了可以单独或串联表达NDV Italien株HN和F基因的真核表达质粒或重组病毒颗粒，使这两种基因能够在真核细胞，包括人体的肿瘤细胞、转化细胞或异常细胞中同时表达其编码产物HN蛋白和F蛋白，并且这两种蛋白可以导致感染细胞与细胞之间融合形成多核巨细胞，最终产生细胞死亡的细胞毒效应。
- 专利分类
