[发明专利]一种双重扩增法检测DNA或蛋白质的方法有效
| 申请号： | 201910758302.8 | 申请日： | 2019-08-16 |
| 公开（公告）号： | CN110468181A | 公开（公告）日： | 2019-11-19 |
| 发明（设计）人： | 刘卓靓;王建方;陶呈安;邹晓蓉;王芳;黄坚;李玉姣;阳绪衡 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军国防科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/682 | 分类号： | C12Q1/682;G01N33/573 |
| 代理公司： | 43113 长沙正奇专利事务所有限责任公司 | 代理人： | 李发军<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 410073 湖南*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明公开了基于双重扩增法检测目标DNA或蛋白质的方法，包括如下步骤：（1）将待测样品与探针孵育，孵育条件为：20‑40℃，0.5‑1h；（2）将核酸内切酶加入，孵育条件为：20‑40℃，1‑3h；孵育时，核酸内切酶对探针进行切割，释放出含有3’OH的DNA片段。（3）加入末端转移酶（TdT）以及dNTP，DNA缺口端生成G四链体的长链DNA；（4）将经步骤（3）反应后的溶液加入MES缓冲以及高铁血红素（hemin），孵育15‑60min。再加入ABTS及H2O2用紫外检测。根据吸收光信号的强弱实现对目标DNA或蛋白质的检测。该方法是一种简便、信号放大、灵敏检测生物分子的新方法。 | ||
| 搜索关键词： | 孵育 核酸内切酶 目标DNA 蛋白质 高铁血红素 末端转移酶 待测样品 灵敏检测 生物分子 探针孵育 紫外检测 长链DNA 四链体 吸收光 检测 缓冲 扩增 探针 切割 强弱 释放 | ||
【主权项】：
1.一种双重扩增法检测DNA的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：/nS1、将待测样品与识别探针一起孵育，得到A溶液；/nS2、在A溶液中加入核酸内切酶溶液孵育，得到B溶液；/nS3、在B溶液中加入TdT以及dNTP，生成含G四链体的长链DNA的C溶液；/nS4、在C溶液中加入MES缓冲液、血红素孵育后加入ABTS及H2O2进行检测。/n
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