[发明专利]一种性腺组织中特异高表达基因增加雄鱼繁殖力的方法在审
| 申请号： | 201910736721.1 | 申请日： | 2019-08-10 |
| 公开（公告）号： | CN110396518A | 公开（公告）日： | 2019-11-01 |
| 发明（设计）人： | 张运生;刘良国;杨品红 | 申请（专利权）人： | 湖南文理学院 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/63;A01K67/027 |
| 代理公司： | 重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) 50230 | 代理人： | 陈炳萍 |
| 地址： | 415000 湖南*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明属于基因表达技术领域，公开了一种性腺组织中特异高表达基因增加雄鱼繁殖力的方法，提取性腺组织RNA‑反转录为cDNA，cDNA为模板，tesk1‑F/tesk1‑R为引物，高保真酶pfu进行PCR扩增；所用载体为含有kop启动子和nanos 3’UTR的质粒载体，kop启动子和nanos3’UTR能将目的基因在生殖细胞中特异表达，通过NcoI和BseAI酶切，将tesk1基因插入kop启动子和nanos3’UTR之间，形成转基因载体；显微注射获得转基因鱼。本发明在雄鱼性腺组织中特异高表达tesk1基因，发现可以显著性增加雄鱼的性腺指数，增加其产精量，实现了提高雄性斑马鱼生殖能力的目的。 | ||
| 搜索关键词： | 性腺组织 雄鱼 启动子 高表达基因 繁殖力 生殖细胞 基因表达技术 转基因载体 高保真酶 基因插入 目的基因 生殖能力 特异表达 显微注射 性腺指数 质粒载体 转基因鱼 斑马鱼 反转录 高表达 显著性 精量 酶切 引物 基因 发现 | ||
【主权项】：
1.一种性腺组织中特异高表达基因增加雄鱼繁殖力的方法，其特征在于，所述性腺组织中特异高表达基因增加雄鱼繁殖力的方法包括以下步骤：第一步，提取性腺组织RNA，反转录为cDNA，以cDNA为模板，以tesk1‑F/tesk1‑R为引物，以高保真酶pfu进行PCR扩增，tesk1基因的克隆；第二步，所用载体为含有kop启动子和nanos 3’UTR的质粒载体，kop启动子和nanos3’UTR能将目的基因在生殖细胞中特异表达，通过NcoI和BseAI酶切，将tesk1基因插入kop启动子和nanos3’UTR之间，形成转基因载体；第三步，显微注射获得转基因鱼。
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