[发明专利]一种卵黄免疫球蛋白的检测方法有效
| 申请号: | 201910733486.2 | 申请日: | 2019-08-09 |
| 公开(公告)号: | CN110470846A | 公开(公告)日: | 2019-11-19 |
| 发明(设计)人: | 张南文;黄丽珊;闫梦茹;刘蕊;张鑫;于鹤;陈智婕;陈晓乐 | 申请(专利权)人: | 福建医科大学 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/543;G01N21/76;G01N1/34;G01N1/40 |
| 代理公司: | 35214 福州市博深专利事务所(普通合伙) | 代理人: | 柯玉珊<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址: | 350122 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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| 摘要: | 本发明涉及一种卵黄免疫球蛋白的检测方法,包括以下步骤:(1)将配制好的浓缩胶进行灌胶,将变性后的已知浓度的蛋白样品分别加入多个上样孔中;(2)将上样后的蛋白样品进行电泳;(3)将电泳后的整块胶放置于活化后的固相支持物上,然后转移至加有冰块的转膜缓冲液中,进行转膜;(4)将转膜后的固相支持物进行封闭;(5)将封闭后的固相支持物进行清洗,然后用含有HRP的IgY抗体进行抗体敷育;(6)将抗体敷育后的固相支持物进行清洗,然后采用ECL显色液进行显色,并采用化学发光显影仪进行显影成像;(7)将显影成像获得的图片进行灰度分析。本发明的IgY的检测方法不仅可对IgY的含量进行检测,还可对其纯度进行分析。 | ||
| 搜索关键词: | 固相支持物 转膜 电泳 蛋白样品 抗体 上样 显影 成像 检测 清洗 卵黄免疫球蛋白 化学发光 灰度分析 缓冲液 浓缩胶 显色液 显影仪 冰块 封闭 变性 灌胶 活化 显色 整块 配制 分析 图片 | ||
【主权项】:
1.一种卵黄免疫球蛋白的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:/n(1)将配制好的浓缩胶进行灌胶,待浓缩胶凝固后,将制胶板转移至电泳槽中,加满电泳缓冲液后取下梳子,将变性后的已知浓度的蛋白样品分别加入多个上样孔中,且每个上样孔中的蛋白样品的含量相同;/n(2)将步骤(1)上样后的蛋白样品进行电泳;/n(3)将步骤(2)电泳后的整块胶放置于活化后的固相支持物上,然后转移至加有冰块的转膜缓冲液中,进行转膜;/n(4)将步骤(3)转膜后的固相支持物进行封闭;/n(5)将步骤(4)封闭后的固相支持物进行清洗,然后用含有HRP的抗IgY抗体进行抗体敷育;/n(6)将步骤(5)抗体敷育后的固相支持物进行清洗,然后采用显色液进行显色,并采用化学发光显影仪进行显影成像;/n(7)将步骤(6)显影成像获得的图片进行灰度分析。/n
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