[发明专利]肝细胞生长因子的重组表达方法在审
申请号: | 201910678094.0 | 申请日: | 2019-07-25 |
公开(公告)号: | CN110607304A | 公开(公告)日: | 2019-12-24 |
发明(设计)人: | 游婷婷 | 申请(专利权)人: | 广州凌腾生物医药有限公司 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/85;C12N5/10;C07K14/475 |
代理公司: | 44224 广州华进联合专利商标代理有限公司 | 代理人: | 林青中 |
地址: | 510000 广东省广州市黄埔区(*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明提供了一种肝细胞生长因子的重组表达方法,包括:分别构建表达肝细胞生长因子α链的质粒和表达肝细胞生长因子β链的质粒,使得α链和β链两条链在哺乳动物细胞中共表达,并且能够在哺乳动物细胞内自发形成二硫键,从而自然组装成完整的肝细胞生长因子并分泌至细胞培养的上清液中。这种表达肝细胞生长因子的方法,无需经过任何酶处理,即可一步获得具有生物活性的成熟肝细胞生长因子,避免了添加血清或蛋白酶容易带来的批次差异性大、供应不稳定以及安全性的问题。 | ||
搜索关键词: | 肝细胞生长因子 哺乳动物细胞 质粒 细胞培养 成熟肝细胞 蛋白酶 批次差异 生长因子 生物活性 重组表达 二硫键 酶处理 上清液 血清 构建 条链 分泌 组装 | ||
【主权项】:
1.一种肝细胞生长因子的重组表达方法,其特征在于,包括:分别构建表达肝细胞生长因子α链的质粒和表达肝细胞生长因子β链的质粒,将所述表达肝细胞生长因子α链的质粒和表达肝细胞生长因子β链的质粒共转染至哺乳动物细胞中,培养;/n所述肝细胞生长因子α链的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示;/n所述肝细胞生长因子β链的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。/n
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