[发明专利]一种利用AaSPL2基因提高青蒿中青蒿素含量的方法在审
| 申请号： | 201910670386.X | 申请日： | 2019-07-24 |
| 公开（公告）号： | CN110438148A | 公开（公告）日： | 2019-11-12 |
| 发明（设计）人： | 张磊;唐克轩;陈万生;王玉亮;吕宗友;季倩 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第二军医大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/14 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 孙跃虹 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种利用AaSPL2基因提高青蒿中青蒿素含量的方法，包括如下步骤：从青蒿中克隆水杨酸信号途径AaSPL2基因，构建含AaSPL2基因的植物表达载体，用根癌农杆菌介导，将AaSPL2基因转入青蒿并再生出植株，PCR检测外源目的基因AaSPL2的整合情况，再测定转基因青蒿中青蒿素的含量，筛选获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。本发明获得的转基因青蒿中青蒿素的含量显著提高，最高达到非转化对照植株的1.8倍，为利用转基因青蒿大规模生产青蒿素打下了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 青蒿素 青蒿 转基因青蒿 基因 植株 根癌农杆菌介导 转基因青蒿植株 外源目的基因 植物表达载体 水杨酸信号 构建 整合 克隆 筛选 再生 转入 转化 | ||
【主权项】：
1.一种利用AaSPL2基因提高青蒿中青蒿素含量的方法，包括如下步骤：S1：采用基因克隆方法获得青蒿关键酶基因AaSPL2；S2：把AaSPL2基因可操作性地连接于表达调控序列，形成含AaSPL2基因的植物表达载体；S3：将含AaSPL2基因的植物表达载体转化根癌农杆菌，获得用于转化青蒿的含AaSPL2基因植物表达载体的根癌农杆菌菌株；S4：利用所构建的根癌农杆菌菌株转化青蒿，获得经PCR检测为阳性的转基因青蒿植株；S5：对获得的转基因青蒿中青蒿素含量进行HPLC‑ELSD测定，筛选获得青蒿素含量显著提高的转基因青蒿植株。
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