[发明专利]转F3H基因提高青蒿中青蒿素含量的方法有效
| 申请号： | 201610221838.2 | 申请日： | 2016-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN105861544B | 公开（公告）日： | 2019-04-09 |
| 发明（设计）人： | 赵静雅;王路尧;张颖;付雪晴;张婷婷;张利达;钱虹妹;唐克轩 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N15/84 | 分类号： | C12N15/84;C12N9/02;C12N15/53;A01H5/00;A01H6/14;A01H4/00 |
| 代理公司： | 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 | 代理人： | 郑立 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明是一种生物技术领域的转F3H基因提高青蒿中青蒿素含量的方法。本发明从青蒿中克隆黄烷酮‑3‑羟化酶F3H基因，构建含F3H基因的植物表达载体，用根癌农杆菌介导，将F3H基因转入青蒿并再生出植株，PCR检测外源目的基因F3H的整合情况，HPLC‑ELSD转基因青蒿中青蒿素的含量，筛选获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。本发明获得的转基因青蒿中青蒿素含量显著提高，最高达到非转化对照植株的1.95倍，从而提供了一种提高青蒿中青蒿素含量的方法，为利用转基因青蒿大规模生产青蒿素打下了基础。 | ||
| 搜索关键词： | f3h 基因 提高 青蒿 青蒿素 含量 方法 | ||
【主权项】：
1.一种转F3H基因提高青蒿中青蒿素含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)采用基因克隆方法获得F3H基因，所述F3H基因的DNA序列如SEQ ID NO.1所示；(2)把所述F3H基因连接于表达调控序列，构建含F3H基因的植物表达载体；(3)将所述含F3H基因的植物表达载体转化根癌农杆菌，获得含所述F3H基因植物表达载体的根癌农杆菌菌株；(4)利用所述含F3H基因植物表达载体的根癌农杆菌菌株转化青蒿，获得经PCR检测的整合外源目的基因F3H的转基因青蒿植株；(5)对所述转基因青蒿中青蒿素含量进行HPLC‑ELSD测定，筛选获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。
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