[发明专利]转AaWRKY1基因提高青蒿中青蒿素含量的方法无效
| 申请号： | 201210249469.X | 申请日： | 2012-07-18 |
| 公开（公告）号： | CN102776225A | 公开（公告）日： | 2012-11-14 |
| 发明（设计）人： | 唐克轩;江伟民;陆续;邱波;王国丰 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/29;C12Q1/68;G01N30/02;A01H5/00 |
| 代理公司： | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人： | 郭国中 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种转AaWRKY1基因提高青蒿中青蒿素含量的方法，包括以下步骤：从青蒿中克隆青蒿中WRKY类转录因子AaWRKY1基因；构建含AaWRKY1基因的植物表达载体；用根癌农杆菌介导，将AaWRKY1基因转入青蒿并再生出植株；PCR检测外源目的基因AaWRKY1的整合情况；高效液相色谱法及蒸发光散射检测器测定转基因青蒿中青蒿素的含量，筛选获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。本发明提供的转AaWRKY1基因青蒿中青蒿素的含量达到24.59mg/g DW，其含量是非转化青蒿含量的4.44倍，从而提供了一种提高青蒿中青蒿素含量的方法，为青蒿素的规模化生产提供了高产、稳定的新药源。 | ||
| 搜索关键词： | aawrky1 基因 提高 青蒿 青蒿素 含量 方法 | ||
【主权项】：
一种转AaWRKY1基因提高青蒿中青蒿素含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，采用基因克隆方法获得青蒿WRKY类转录因子AaWRKY1基因；步骤二，把所述AaWRKY1基因连结于表达调控序列，构建含AaWRKY1基因的植物表达载体；步骤三，将所述含AaWRKY1基因的植物表达载体转化根癌农杆菌，获得用于转化青蒿的含所述AaWRKY1基因植物表达载体的根癌农杆菌菌株；步骤四，利用所述构建的根癌农杆菌菌株转化青蒿，获得经PCR检测的整合外源目的基因AaWRKY1基因的转基因青蒿植株；步骤五，对所述转基因青蒿中青蒿素含量进行HPLC‑ELSD测定，筛选获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。
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