[发明专利]一种葡萄抗体库的制备方法在审

专利信息
申请号: 201910653969.1 申请日: 2019-07-19
公开(公告)号: CN110484974A 公开(公告)日: 2019-11-22
发明(设计)人: 张颖;刘崇怀;刘锐涛;樊秀彩;李民;姜建福 申请(专利权)人: 中国农业科学院郑州果树研究所
主分类号: C40B50/06 分类号: C40B50/06;C40B40/10;C40B50/18;C07K16/16
代理公司: 44202 广州三环专利商标代理有限公司 代理人: 郝传鑫;颜希文<国际申请>=<国际公布>
地址: 450000 河*** 国省代码: 河南;41
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摘要: 发明提供了一种葡萄抗体库的制备方法,包括以下步骤:提取葡萄蛋白抗原,将获得的蛋白抗原对小鼠进行免疫;将免疫小鼠的脾脏及淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,获得杂交瘤细胞,并制备抗体;将获得的抗体点制在芯片上,获得葡萄抗体芯片;对获得的葡萄抗体芯片进行筛选,通过数据分析获得靶向所述葡萄蛋白质芯片上固定的蛋白质的富集的特异性抗体库。本发明首次利用蛋白组制备了覆盖葡萄果皮、叶片、果实、核的抗体库;发明中获得抗体的方法通量高,获得了2000多个抗体,单个抗体成本低,效率高;本发明中制备抗体的质量好,可以满足western blot和IP实验的要求,可以直接在实验中应用。
搜索关键词: 抗体 葡萄 制备 蛋白抗原 抗体芯片 抗体库 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 蛋白质芯片 特异性抗体 杂交瘤细胞 免疫小鼠 葡萄果皮 数据分析 蛋白组 固定的 脾脏 靶向 点制 富集 通量 小鼠 叶片 蛋白质 果实 筛选 芯片 融合 覆盖 应用
【主权项】:
1.一种葡萄抗体库的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:/n(1)从葡萄中提取蛋白抗原,制得葡萄建库蛋白样本;/n(2)将获得的蛋白抗原对小鼠进行免疫,免疫小鼠的脾脏及淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,获得杂交瘤细胞,并制备抗体;/n(3)将获得的抗体点制在芯片上,获得葡萄抗体芯片;/n(4)对获得的葡萄抗体芯片进行筛选,通过数据分析获得靶向所述葡萄蛋白质芯片上固定的蛋白质的富集的特异性抗体库。/n
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