[发明专利]一种检测miRNA的荧光生物传感器及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201910608584.3 | 申请日： | 2019-07-08 |
| 公开（公告）号： | CN110305939B | 公开（公告）日： | 2022-09-30 |
| 发明（设计）人： | 黄加栋;赵一菡;刘素;王玉 | 申请（专利权）人： | 济南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 李桂存 |
| 地址： | 250022 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及基于DNA三股螺旋结构引发滚环扩增超灵敏检测MicroRNA的荧光生物传感器。为了解决检测MicroRNA的方法中特异性和灵敏度都比较低，且成本高的问题。本发明提供了一种基于基于DNA三股螺旋结构引发滚环扩增超灵敏检测MicroRNA生物传感器，将DNA聚合酶phi29，切刻内切酶Nt.Bbvcl的辅助靶标回收，以及滚环扩增，实现荧光信号循环放大作用；制备方法包括：THSS的合成、环形探针的构建、荧光检测实现信号放大的作用；本申请制备的荧光生物传感器可实现定量检测MicroRNA。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 mirna 荧光 生物 传感器 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种检测miRNA的荧光生物传感器，其特征在于，包括缓冲液、目标物、THS链、SP链、padlock probe链、ligation probe链、T4 DNA连接酶、核酸外切酶 I、核酸外切酶 III、DNA聚合酶phi29、切刻内切酶Nt.Bbvcl；所述的DNA链的序列如下：THS如SEQ No.1所示；SP如SEQ No.2所示；padlock probe如SEQ No.3所示；ligation probe如SEQ No.4所示；所述的THS 链的5’末端修饰荧光基团FAM， 3’末端修饰猝灭基团BHQ1, padlock probe链 5’末端磷酸化；所述的目标物为miRNA‑21序列如SEQ No.5所示。
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