[发明专利]诱导肿瘤细胞上调抗原MUC1表达用CAR及其应用

摘要

本申请属于肿瘤细胞免疫治疗技术领域，具体涉及一种能诱导肿瘤细胞上调抗原MUC1表达的CAR及其应用专利申请事宜。该嵌合抗原受体为一若干蛋白片段连接的氨基酸序列，具体为：依次连接的人CD8a分子信号肽、人源化MUC1单链抗体、人CD8分子跨膜区与41BB分子胞内区、人CD3z分子胞内区；优选设计中，人CD3z分子胞内区进一步通过连接序列与IL22 CDS区序列进行连接，以进一步通过IL‑22这一细胞因子来促进MUC1的表达。本申请通过对于CAR的进一步结构优化，对于有效诱导肿瘤细胞表面抗原MUC1表达、减少脱靶效应的发生，以及提高CAR‑T细胞的应用效果都表现出良好的技术效果。

主权项

1.一种能诱导肿瘤细胞上调抗原MUC1表达的CAR，其特征在于，该嵌合抗原受体为一若干蛋白片段连接的氨基酸序列，以MUC1‑41BB‑CD3z命名，具体为：依次连接的人CD8a分子信号肽CMV、人源化MUC1单链抗体scFV.MUC1、人CD8分子跨膜区与41BB分子胞内区41BB、人CD3z分子胞内区CD3Zeta，即：CMV—scFV.MUC1—41BB—CD3Zeta；所述人CD8a分子信号肽CMV，包括21个氨基酸，序列如SEQ ID No.1所示，具体为：MALPVTALLLPLALLLHAARP；所述人源化MUC1单链抗体scFV.MUC1，包括244个氨基酸，序列如SEQ ID No.2所示，具体为：EVQLQQSGGGLVQPGGSMKLSCVASGFTFSNYWMNWVRQSPEKGLEWVAEIRLKSNNYATHYAESVKGRFTISRDDSKSSVYLQMNNLRAEDTGIYYCTFGNSFAYWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVVTQESALTTSPGETVTLTCRSSTGAVTTSNYANWVQEKPDHLFTGLIGGTNNRAPGVPARFSGSLIGDKAALTITGAQTEDEAIYFCALWYSNHWVFGGGTKLTVLGSE；所述人CD8分子跨膜区与41BB分子胞内区41BB，包括人CD8分子跨膜区与41BB分子胞内区两个部分，其中人CD8分子跨膜区，包括71个氨基酸，序列如SEQ ID No.3所示，具体为：LETTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYC；41BB分子胞内区，包括42个氨基酸，序列如SEQ ID No.4所示，具体为：KRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL；所述人CD3z分子胞内区CD3Zeta，包括112个氨基酸，序列如SEQ ID No.5所示，具体为：RVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR。