[发明专利]鸡骨香挥发油抗肿瘤活性及其相关机制的测试方法及应用在审
| 申请号： | 201910472431.0 | 申请日： | 2019-05-31 |
| 公开（公告）号： | CN110208515A | 公开（公告）日： | 2019-09-06 |
| 发明（设计）人： | 刘超;孙金月;张瑞瑞;王青;程安玮;王新坤;郭溆 | 申请（专利权）人： | 山东省农业科学院农产品研究所 |
| 主分类号： | G01N33/50 | 分类号： | G01N33/50;G01N33/535;G01N33/533;G01N33/569;G01N33/574 |
| 代理公司： | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 牟炳彦 |
| 地址： | 250100 山东省济南市历城区*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明属于医药学技术领域，公开了一种鸡骨香挥发油抗肿瘤活性及其相关机制的测试方法及应用，所述鸡骨香挥发油抗肿瘤活性及其相关机制的测试方法为：依次进行细胞凋亡检测，Hoechst 33258染色，线粒体膜电位染色，活性氧种类测定，实时荧光定量PCR分析，蛋白质印迹分析（Image J灰度分析定量），数据统计分析。本发明表明鸡骨香挥发油通过线粒体介导的内源途径诱导A549细胞凋亡，能诱导细胞周期停滞和细胞凋亡，是一种潜在的抗癌药物；因此，这些证据表明鸡骨香挥发油可作为一种新型化学预防或化学治疗剂用于癌症的治疗，为进一步开发用于临床分析的药物提供依据。 | ||
| 搜索关键词： | 挥发油 鸡骨香 抗肿瘤活性 相关机制 细胞凋亡 染色 测试 实时荧光定量PCR 蛋白质印迹分析 数据统计分析 线粒体膜电位 诱导细胞周期 化学治疗剂 灰度分析 抗癌药物 临床分析 新型化学 药物提供 种类测定 医药学 活性氧 潜在的 线粒体 凋亡 骨香 介导 内源 种鸡 应用 诱导 停滞 癌症 检测 证据 预防 治疗 分析 开发 | ||
【主权项】：
1.一种鸡骨香挥发油抗肿瘤活性及其相关机制的测试方法，其特征在于，所述鸡骨香挥发油抗肿瘤活性及其相关机制的测试方法包括：第一步，细胞凋亡检测，采用膜联蛋白V‑FITC /碘化丙啶试验测定细胞凋亡；第二步，Hoechst 33258染色，检测凋亡细胞的形态学评估；第三步，吖啶橙/溴化乙锭染色，进行细胞死亡检测；第四步，线粒体膜电位染色，采用JC‑1检测试剂盒检测线粒体膜电位的变化；第五步，活性氧种类测定，通过2,7‑二氯荧光素二乙酸酯氧化敏感性荧光探针评估ROS的产生；第六步，实时荧光定量PCR分析，使用TRIzol试剂从细胞中提取总RNA，使用逆转录试剂盒逆转录获得cDNA，随后进行PCR反应；第七步，蛋白质印迹分析，并通过Image J软件对目的蛋白条带进行灰度分析；第八步，统计分析，使用t检验进行数据组之间的差异检测。
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