[发明专利]谷氨酸脱氢酶突变体及其应用有效
| 申请号： | 201910403331.2 | 申请日： | 2019-05-15 |
| 公开（公告）号： | CN110184246B | 公开（公告）日： | 2020-10-13 |
| 发明（设计）人： | 杨立荣;尹新坚;吴坚平;徐刚 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N9/06 | 分类号： | C12N9/06;C12N15/53;C12P13/00 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 万静 |
| 地址： | 310013 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了谷氨酸脱氢酶突变体及其应用，该突变体为下列之一：将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第402位赖氨酸突变为苯丙氨酸或天冬氨酸；第406位异亮氨酸突变为苯丙氨酸或苏氨酸；第121位苏氨酸和123位亮氨酸进行组合突变；第379位丙氨酸和383位亮氨酸进行组合突变。本发明通过定向进化与半理性设计相结合的分子改造方法，显著提高了源于Pseudomonas putida的谷氨酸脱氢酶对2‑羰基‑4‑(羟基甲基膦酰基)丁酸(PPO)的催化活力；解决了还原胺化法制备L‑草铵膦工艺中谷氨酸脱氢酶酶活低的问题。 | ||
| 搜索关键词： | 谷氨酸 脱氢酶 突变体 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.谷氨酸脱氢酶突变体，其特征在于，所述谷氨酸脱氢酶突变体为下列之一：(1)将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第402位赖氨酸突变为苯丙氨酸或天冬氨酸；(2)将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第406位异亮氨酸突变为苯丙氨酸或苏氨酸；(3)将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第121位苏氨酸和123位亮氨酸分别突变为丝氨酸和组氨酸，或天冬酰胺和酪氨酸，或缬氨酸和酪氨酸，或丝氨酸和丝氨酸，或天冬酰胺和苯丙氨酸，或缬氨酸和苯丙氨酸，或异亮氨酸和酪氨酸；(4)将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第379位丙氨酸和383位亮氨酸分别突变为异亮氨酸和酪氨酸，或异亮氨酸和半胱氨酸，或丝氨酸和酪氨酸，或缬氨酸和丝氨酸，或苯丙氨酸和半胱氨酸，或酪氨酸和半胱氨酸，或半胱氨酸和半胱氨酸。
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