[发明专利]一种与水稻稻瘟病抗性基因紧密连锁的分子标记的制备方法有效
申请号: | 201910362960.5 | 申请日: | 2019-04-30 |
公开(公告)号: | CN109913581B | 公开(公告)日: | 2022-05-20 |
发明(设计)人: | 曾跃辉;韦新宇;黄建鸿;张锐;尚伟 | 申请(专利权)人: | 三明市农业科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6806 |
代理公司: | 泉州市博一专利事务所(普通合伙) 35213 | 代理人: | 方传榜;蔡俊旭 |
地址: | 365509 *** | 国省代码: | 福建;35 |
权利要求书: | 暂无信息 | 说明书: | 暂无信息 |
摘要: | 一种与水稻稻瘟病抗性基因紧密连锁的分子标记的制备方法,以具有抗稻瘟病特性的水稻品种为父本,感病品种为母本,构建一个用于稻瘟病抗性基因定位的F2分离群体;再从中选取至少10个极端抗病单株和至少10个极端感病单株分别构建抗病基因池和感病基因池;采用改良的CTAB法分别提取两亲本幼苗及两亲本杂交后代幼苗的基因组DNA;筛选两亲本及两基因池间多态性,获得和稻瘟病抗性基因连锁的分子标记,从而对稻瘟病抗性基因进行初步定位;比对粳稻和籼稻两亚种的基因组序列多态性,再对与稻瘟病抗性相关基因进行精细定位,从而获得和抗稻瘟病基因紧密连锁的插入缺失InDel位点,并转化为相关特异性插入缺失InDel分子标记。 | ||
搜索关键词: | 一种 水稻 稻瘟病 抗性 基因 紧密 连锁 分子 标记 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.一种与水稻稻瘟病抗性基因紧密连锁的分子标记的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(一)以具有抗稻瘟病特性的水稻品种为父本,感病品种为母本,构建一个用于稻瘟病抗性基因定位的F2分离群体;(二)从所述F2分离群体中随机选取至少10个极端抗病单株和至少10个极端感病单株分别构建抗病基因池和感病基因池;(三)采用改良的CTAB法分别提取两亲本幼苗及两亲本杂交后代幼苗的基因组DNA;(四)根据水稻生物信息学数据库公开发布的SSR分子标记,通过筛选两亲本及两基因池间多态性,获得和稻瘟病抗性基因连锁的分子标记,从而对稻瘟病抗性基因进行初步定位;(五)比对已完成全基因组测序的粳稻和籼稻两亚种在步骤(四)中已初步定位的染色体区域内的基因组序列多态性,再对与稻瘟病抗性相关基因进行精细定位,从而获得和抗稻瘟病基因紧密连锁的插入缺失InDel位点,再将该插入缺失InDel位点利用Primer Premier 5.0软件设计并转化为相关特异性插入缺失InDel分子标记。
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