[发明专利]复合材料固定化丙酸棒杆菌制备烟酰胺的方法

摘要

本发明涉及一种烟酰胺的制备方法，特别涉及一种复合材料固定化丙酸棒杆菌制备烟酰胺的方法，属于生物技术领域。该方法是先将聚乙烯醇、聚乙二醇加水混合加热后搅拌使其充分溶解得到PVA‑PEG水凝胶，再依次加入硅藻土、活性炭充分搅拌后冷却至室温，得到固定化用复合材料；然后将待固定化菌体（湿菌体）加入到固定化用复合材料中，制备PVA‑PEG小圆滴，经过烘干、Na2SO4溶液中复膨，收集固定化小圆片，清水洗净，低温保存；加底物3‑氰基吡啶，反应后得到产物烟酰胺。本发明的方法对微生物损伤小、固定化细胞机械强度高，使用寿命长；环境污染小、分离提纯简单、产品纯度高，宜于规模型工业化生产。

主权项

1.一种复合材料固定化丙酸棒杆菌制备烟酰胺的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：1）丙酸棒杆菌的固定化：（1）固定化用复合材料：固定化用复合材料以质量百分含量计的配方为：聚乙烯醇（PVA）5％～20％，聚乙二醇（PEG）3％～10％，硅藻土0.1％～2％，活性炭0.1％～1％，余量为水，以上组分质量总计为100%；聚乙烯醇、聚乙二醇加水混合加热后搅拌使其充分溶解得到PVA‑PEG水凝胶，再依次加入硅藻土、活性炭充分搅拌后冷却至室温，得到固定化用复合材料；（2）将经过液体培养得到的待固定化菌体与固定化用复合材料混合，充分搅拌，使菌体与固定化用复合材料混合均匀；（3）将步骤（2）得到的混合物滴到PE板上，形成直径3～6mm的点矩阵；（4）将步骤（3）得到的滴有小圆片的PE板放入烘箱中，使其含水率降至10%～25%；（5）将步骤（4）得到的PE板置于Na₂SO₄水溶液中，使PE板上的小圆片在Na₂SO₄水溶液中浸没；（6）收集制备的PVA‑PEG小圆片，洗净后低温保存；2）烟酰胺的制备：在质量浓度为10～30% 的3‑氰基吡啶溶液中加入上述步骤得到的固定化小圆片，固定化小圆片的加入量为10‑30%，反应时间60～240min后得到烟酰胺。