[发明专利]复合材料固定化丙酸棒杆菌制备烟酰胺的方法

权利要求书

1.一种复合材料固定化丙酸棒杆菌制备烟酰胺的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

1）丙酸棒杆菌的固定化：

（1）固定化用复合材料：

固定化用复合材料以质量百分含量计的配方为：

聚乙烯醇（PVA）5％～20％，

聚乙二醇（PEG）3％～10％，

硅藻土0.1％～2％，

活性炭0.1％～1％，

余量为水，以上组分质量总计为100%；

聚乙烯醇、聚乙二醇加水混合加热后搅拌使其充分溶解得到PVA-PEG水凝胶，再依次加入硅藻土、活性炭充分搅拌后冷却至室温，得到固定化用复合材料；

（2）将经过液体培养得到的待固定化菌体与固定化用复合材料混合，充分搅拌，使菌体与固定化用复合材料混合均匀；

（3）将步骤（2）得到的混合物滴到PE板上，形成直径3～6mm的点矩阵；

（4）将步骤（3）得到的滴有小圆片的PE板放入烘箱中，使其含水率降至10%～25%；

（5）将步骤（4）得到的PE板置于Na₂SO₄水溶液中，使PE板上的小圆片在Na₂SO₄水溶液中浸没；

（6）收集制备的PVA-PEG小圆片，洗净后低温保存；

2）烟酰胺的制备：

在质量浓度为10～30% 的3-氰基吡啶溶液中加入上述步骤得到的固定化小圆片，固定化小圆片的加入量为10-30%，反应时间60～240min后得到烟酰胺。

2. 根据权利要求1所述的复合材料固定化丙酸棒杆菌制备烟酰胺的方法，其特征在于：步骤(2)中，菌体的液体培养基组成为：葡萄糖10～40g，酵母膏5～20g，尿素2～10g，磷酸二氢钾1～5g，磷酸氢二钾1～5g，硫酸镁1～5g，谷氨酸钠2～6g，氯化钴0.001～0.01g，加水至1L，pH值为6.8～7.5；培养条件为：250ml三角瓶装10～30%的培养基，灭菌后加入1～10%的菌种，于摇床上以100～300rpm 恒温振荡培养，培养温度25～35℃，培养时间36～108h。

3.根据权利要求1所述的复合材料固定化丙酸棒杆菌制备烟酰胺的方法，其特征在于：步骤(2)中，菌体与固定化用复合材料的质量比为0.1～1:10。

4.根据权利要求1所述的复合材料固定化丙酸棒杆菌制备烟酰胺的方法，其特征在于：步骤(4)中使PVA-PEG小圆片含水率下降的烘箱温度设置在20-50℃，烘干时间为30-120min。

5.根据权利要求1所述的复合材料固定化丙酸棒杆菌制备烟酰胺的方法，其特征在于：步骤(5)中，Na₂SO₄的质量百分含量为1～20%，小圆片的浸泡时间为20～40min。

6.根据权利要求1所述的复合材料固定化丙酸棒杆菌制备烟酰胺的方法，其特征在于：步骤(6)中保存温度为2～10℃。

7.根据权利要求1所述的复合材料固定化丙酸棒杆菌制备烟酰胺的方法，其特征在于：所述的聚乙二醇是聚乙二醇200、聚乙二醇400、聚乙二醇800、聚乙二醇2000、聚乙二醇4000中的任意一种；所述的聚乙烯醇是聚乙烯醇1799、聚乙烯醇1788中的一种。