[发明专利]一种快速检测产四环素类抗生素降解酶细菌的方法在审
| 申请号： | 201910291334.1 | 申请日： | 2019-04-12 |
| 公开（公告）号： | CN110031576A | 公开（公告）日： | 2019-07-19 |
| 发明（设计）人： | 孙坚;陈冲;蒋鹏;崔超月;廖晓萍;刘雅红 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | G01N30/06 | 分类号： | G01N30/06;G01N30/72 |
| 代理公司： | 广州正明知识产权代理事务所(普通合伙) 44572 | 代理人： | 成姗 |
| 地址： | 510000 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于生物检测技术领域，特别涉及一种能够检测产四环素类抗生素降解酶细菌的质谱方法，包括以下步骤:S1.细菌与药物共培养：将待测细菌进行培养，得到培养液，并加入四环素类抗生素标准品溶液（四环素类抗生素的终浓度为140~160μg/mL），混匀后30~40℃条件下孵育6~10h；S2.样品前处理：将孵育好的共培养物离心，吸取上清液，在靶板上进行点靶，自然晾干，随后用α‑氰基‑4‑羟基肉桂酸覆盖并再次自然晾干；S3.样品的测定和数据分析：将步骤S2中经过点靶后的靶板采用质谱法进行检测，分析质谱范围依四环素类抗生素的种类而定。本方法具有灵敏度高、准确度高及分辨率高的特点，适用于产四环素类抗生素降解酶细菌的检测。 | ||
| 搜索关键词： | 四环素类抗生素 细菌 降解酶 自然晾干 靶板 孵育 检测 培养液 生物检测技术 标准品溶液 样品前处理 羟基肉桂酸 准确度 分析质谱 共培养物 快速检测 数据分析 分辨率 灵敏度 上清液 质谱法 混匀 氰基 质谱 覆盖 | ||
【主权项】：
1.一种检测产四环素类抗生素降解酶细菌的方法，其特征在于，将待测样品与四环素类抗生素标准品的共培养物作为实验组，只含有四环素类抗生素标准品的溶液作为阳性对照组，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法检测；若实验组中四环素类抗生素特异性离子峰消失，则判定待测样品为产四环素类抗生素降解酶的细菌；若观察到代表四环素类抗生素的特异性离子峰相对阳性对照组明显减弱，判定该细菌产四环素类抗生素降解酶；若观察到代表四环素类抗生素的特异性离子峰相对阳性对照组几乎不变，判定该细菌不会产出四环素类抗生素降解酶。
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