[发明专利]一种无痕化双靶点基因组编辑系统有效

专利信息
申请号: 201910201916.6 申请日: 2019-03-18
公开(公告)号: CN109825522B 公开(公告)日: 2022-09-23
发明(设计)人: 郑继平;郭桂英;曾纪锋;杨诺;周楚新;李迁 申请(专利权)人: 海南大学
主分类号: C12N15/70 分类号: C12N15/70;C12N15/90
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 570228*** 国省代码: 海南;46
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摘要: 发明公开一种基于CRISPR/Cas9和λ‑Red的无痕化双靶点基因组编辑系统,其特征在于:1.pKS9分子量11,681kb,为温敏性质粒。含有基因:受四环素诱导的cas9和recX基因;受阿拉伯糖诱导的λ‑Red完整αβγ重组酶基因;抗性基因ampr。2.pCSK分子量2,914 kb,含有两个用于特异性识别基因组的sgRNA插入位点;两个受鼠李糖诱导、用于自身质粒消除的间隔区gRNA序列;抗性基因kanr。3.在同源臂27bp时,同时双点突变效率皆在92%以上;在同源臂40bp时,同时双基因的1kb替换效率在60%以上,当大片段基因替换和点突变同时进行时,各自的编辑效率不受影响。
搜索关键词: 一种 无痕化双靶点 基因组 编辑 系统
【主权项】:
1.一种无痕化双靶点基因组编辑系统其特征在于由一个温敏型的辅助质粒pKS9和一个具有自我消除的双基因位点靶向质粒pCSK所组成。
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