[发明专利]基于平衡UDP-糖供给合成乳酰-N-新四糖的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法与应用

摘要

本发明公开了一种基于平衡UDP‑糖供给合成乳酰‑N‑新四糖的方法，所述重组枯草芽孢杆菌是通过在宿主菌Bacillus subtilis 168△amyE:P43‑lacY，P43‑lgtB，PxylA‑comK的基因组上整合两个β‑1,4‑半乳糖转移酶，并整合葡萄糖‑6‑磷酸异构酶基因、谷氨酰胺‑果糖‑6‑磷酸氨基转移酶基因、UTP‑葡萄糖‑1‑磷酸尿苷酰转移酶基因、UDP‑葡萄糖‑差向异构酶基因，且敲除UDP‑葡萄糖6‑脱氢酶基因，并外源表达β‑1,3‑N‑葡糖氨基转移酶基因得到的。本发明构建的重组枯草芽孢杆菌合成乳酰‑N‑新四糖，在摇瓶上的产量可达到1800mg/L，实现了乳酰‑N‑新四糖的高效合成。

主权项

1.一种基于平衡UDP‑糖供给合成乳酰‑N‑新四糖的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述重组枯草芽孢杆菌是通过在宿主菌Bacillus subtilis 168 △amyE:P₄₃‑lacY，P₄₃‑lgtB，P_xylA‑comK的基因组上整合两个β‑1,4‑半乳糖转移酶，并整合葡萄糖‑6‑磷酸异构酶基因、谷氨酰胺‑果糖‑6‑磷酸氨基转移酶基因、UTP‑葡萄糖‑1‑磷酸尿苷酰转移酶基因、UDP‑葡萄糖‑差向异构酶基因，且敲除UDP‑葡萄糖6‑脱氢酶基因，并外源表达β‑1,3‑N‑葡糖氨基转移酶基因得到的。