[发明专利]酵母重组人源I型胶原α1链蛋白、合成方法及其应用在审
申请号: | 201910126233.9 | 申请日: | 2019-02-20 |
公开(公告)号: | CN109988234A | 公开(公告)日: | 2019-07-09 |
发明(设计)人: | 梁亮;张永正 | 申请(专利权)人: | 江苏悦智生物医药有限公司 |
主分类号: | C07K14/78 | 分类号: | C07K14/78;C12N15/81;A61L15/28;A61L15/32;A61L26/00;A61L27/20;A61L27/24;A61L27/54;A61K8/34;A61K8/44;A61K8/49;A61K8/63;A61K8/64 |
代理公司: | 北京华际知识产权代理有限公司 11676 | 代理人: | 李浩 |
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摘要: | 本发明公开了一种酵母重组人源I型胶原α1链蛋白、合成方法及其应用,本发明的重组人源I型胶原α1链蛋白,由N端亲和纯化标记、人源I型胶原蛋白α1链成熟肽序列及C端亲和纯化标记组成,在其两端设计的双特异性亲和纯化标记,有利于该重组蛋白的纯化,也有利于其检测及全长鉴定。本发明首先在基因水平上利用毕赤酵母惯用密码子优化胶原基因序列并人工全基因合成,然后通过PCR、酶切、连接等构建成重组载体,并整合进酵母染色体中,构建成分泌表达重组人源I型胶原α1链蛋白的重组毕赤酵母工程菌。本发明的重组人源I型胶原α1链蛋白携带的双特异性亲和纯化标记,可进行两步特异性纯化,易于得到高纯度的产品。 | ||
搜索关键词: | 人源 亲和纯化 蛋白 酵母 合成 重组毕赤酵母 成熟肽序列 惯用密码子 酵母染色体 全基因合成 特异性纯化 毕赤酵母 分泌表达 基因水平 胶原基因 重组蛋白 重组载体 高纯度 工程菌 构建 酶切 整合 应用 携带 检测 优化 | ||
【主权项】:
1.一种酵母重组人源I型胶原α1链蛋白,其特征在于:所述重组人源I型胶原α1链蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述重组人源I型胶原α1链蛋白包括N端的Strep‑Tag II序列、人源I型胶原蛋白α1链成熟肽序列和C端的6×His序列,使其含有双特异性亲和纯化标记;全长为1071个氨基酸。
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