[发明专利]一种检测miRNA的荧光生物探针及检测方法和用途

摘要

本发明属于生物传感器技术领域，具体涉及一种检测miRNA的荧光生物探针和检测miRNA的荧光生物传感器及其用途和miRNA的检测方法，利用上述的探针检测miRNA时，具有步骤简单、免标记，反应在等温均相溶液中进行，避免了繁琐的分离过程和耗时的热循环的问题，同时巧妙地结合了催化发夹组装技术和λ外切酶(λ‑Exo)辅助信号扩增技术，同时结合了DNA银纳米簇(DNA‑AgNCs)，实现了生物靶标的高灵敏检测，检测限可低至0.89fM，同时可以区分出miRNA家族成员间的单碱基差异，具有较高的特异性，克服现有技术中的miRNA检测方法不能同时兼顾快速、简单和低成本，同时具有高检测灵敏度和高特异性的问题。

主权项

1.一种检测miRNA的荧光生物探针，其特征在于，包括第一发夹、第二发夹和第三发夹；所述第一发夹、第二发夹以及第三发夹均为单链线形分子自身回折后，折叠区域内的互补碱基配对杂交而成，其局部区域形成双链结构的部分为茎干区，未形成双链结构并回折的部分为环状区；所述第一发夹包括：结构域(I)，可与目标miRNA互补杂交；结构域(II)，与所述结构域(I)部分互补杂交形成发夹结构；所述第二发夹包括：结构域(I’)，可与第一发夹的结构域(I)部分互补杂交；结构域(II’)，与所述结构域(I’)一端相连，可与第一发夹的结构域(II)部分互补杂交；结构域(III’)，与所述结构域(I’)另一端相连，可与结构域(II’)部分互补杂交形成发夹结构；所述第三发夹包括：结构域(V)，可与第一发夹的结构域(I)部分互补杂交；结构域(III)，与所述结构域(V)一端相连，可与第二发夹的结构域(III’)互补杂交；报告序列(IV)，与所述结构域(V)另一端相连，与所述结构域(III)部分互补杂交形成发夹结构。