[发明专利]一种可控结晶度细菌纤维素基因工程生产菌的构建方法及其产物和应用在审
| 申请号： | 201910096913.0 | 申请日： | 2019-01-31 |
| 公开（公告）号： | CN109628368A | 公开（公告）日： | 2019-04-16 |
| 发明（设计）人： | 李国强;马挺;刘丹;高歌;吴萌萌 | 申请（专利权）人： | 南开大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P19/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 代芳 |
| 地址： | 300110*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种可控结晶度细菌纤维素基因工程生产菌的构建方法，其构建得到的工程菌株及应用，属于生物技术和生物材料领域。本发明提供的构件方法先以Enterobacter sp.FY‑07基因组为模板，扩增得到可拉酸基因簇原启动子上游同源臂基因和下游同源臂基因；然后将上游同源臂基因、tac启动子、下游同源臂基因融合，得到融合片段；再将融合片段插入骨架质粒，得到重组质粒；最后将重组质粒转移至Enterobacter sp.FY‑07菌株中，得到可控结晶度细菌纤维素基因工程生产菌。利用本发明所述基因工程生产菌合成的细菌纤维素具有明显降低的结晶度、减弱的机械性能、均匀的三维网络结构和显著改善的持水率。 | ||
| 搜索关键词： | 细菌纤维素 基因工程 结晶度 生产菌 同源臂 构建 可控 重组质粒 基因 机械性能 三维网络结构 生物材料领域 启动子上游 工程菌株 骨架质粒 基因融合 片段插入 融合 持水率 基因组 酸基因 菌株 扩增 应用 生物技术 合成 上游 | ||
【主权项】：
1.一种可控结晶度细菌纤维素基因工程生产菌Enterobacter sp.FY‑07::tac的构建方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)以Enterobacter sp.FY‑07基因组DNA为模板，扩增得到可拉酸基因簇原启动子上游同源臂基因和下游同源臂基因；(2)将上游同源臂基因、tac启动子、下游同源臂基因依次融合，得到融合片段；(3)将所述融合片段插入骨架质粒，得到重组质粒；(4)将所述重组质粒转移至Enterobacter sp.FY‑07菌株中，得到可控结晶度细菌纤维素基因工程生产菌Enterobacter sp.FY‑07::tac。
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