[发明专利]基于DNA-铜纳米簇构建的DNA相关酶电化学生物传感器及其应用有效

专利信息
申请号: 201910096695.0 申请日: 2019-01-21
公开(公告)号: CN109613096B 公开(公告)日: 2021-09-10
发明(设计)人: 胡宇芳;张青青;胡丹丹;马少华;郭智勇;王邃 申请(专利权)人: 宁波大学
主分类号: G01N27/327 分类号: G01N27/327;G01N27/48
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 315211 浙江省*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明公开了基于DNA‑铜纳米簇构建的电化学生物传感器及其应用,具体步骤如下:(1)巯基DNA修饰裸金电极(Au)表面,记为Electrode1;(2)取3‑吗啉丙磺酸(MOPS)缓冲液、5×TdT缓冲液、dTTP和TdT制备TdT反应液,滴于Electrode 1表面,在37℃下放置0.5~1.5h,记为Electrode2;(3)向Electrode2中电极表面滴加Cu2+,室温孵育10~30min,蒸馏水缓缓冲洗电极。然后向电极表面滴加抗坏血酸钠溶液,室温反应10~30min,蒸馏水缓缓冲洗电极,记为Electrode3,于PBS(0.1M,pH7.0)电解质溶液中检测电化学响应。优点是特异性好、灵敏度高、检测速度快,并且可以同时检测两种酶的活性及其小分子抑制剂。结果准确可靠、成本低。
搜索关键词: 基于 dna 纳米 构建 相关 电化学 生物 传感器 及其 应用
【主权项】:
1.基于DNA‑铜纳米簇构建的DNA相关酶电化学生物传感器及其应用,其特征在于,机理如下:在底物dTTP存在的条件下,TdT催化单链DNA上的3’‑OH末端进行延伸聚合作用,得到富T DNA长链,通过该长链形成CuNCs,利用铜的溶出产生电化学信号,实现TdT活性检测,而单链DNA在Exo I的存在下被水解,无法实现TdT延伸聚合作用,无法产生电化学信号。Exo I和TdT的浓度变化会影响电化学传感器的电化学响应。
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