[发明专利]一种与外源性核酸原位合成三维结构的方法在审

专利信息
申请号: 201910066173.6 申请日: 2019-01-24
公开(公告)号: CN109797172A 公开(公告)日: 2019-05-24
发明(设计)人: 王雪梅;王毛男;陈芸;姜晖 申请(专利权)人: 东南大学
主分类号: C12P1/00 分类号: C12P1/00
代理公司: 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 代理人: 柏尚春
地址: 210000 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种基于纳米金属单质或纳米金属合金与外源性核酸原位合成三维结构的方法。具体是将一定浓度的纳米金属单质或纳米金属合金与某一核酸溶液,依次添加到含完全培养基的细胞悬液中。将混合液移入培养瓶孵育,经过活细胞的原位合成之后破碎细胞,提取细胞质产物,即可得到一种基于纳米金属单质或纳米金属合金与外源性核酸原位合成的三维结构。该方法可实现外源性DNA片段、长链非编码RNA、微小RNA、环状RNA片段等核酸片段与纳米金属单质或纳米合金单质的三维自组装。其组装产物“核酸‑金属纳米材料”可用于靶向肿瘤细胞,实时高分辨追踪成像与精准定位。
搜索关键词: 纳米金属 单质 原位合成 外源性核酸 三维结构 合金 金属纳米材料 细胞质 完全培养基 非编码RNA 外源性DNA 靶向肿瘤 核酸片段 核酸溶液 混合液移 精准定位 纳米合金 破碎细胞 细胞悬液 环状RNA 微小RNA 高分辨 活细胞 培养瓶 自组装 核酸 长链 孵育 可用 成像 三维 组装 追踪 细胞
【主权项】:
1.一种与外源性核酸原位合成三维结构的方法,其特征在于该方法以肿瘤细胞作为载体,依次添加纳米金属单质或纳米金属合金与外源性核酸,具体进行如下操作:步骤1.将纳米金属单质或纳米金属合金与去离子水的混合体系的pH值调至6.8‑8.0,并灭菌,得到无菌混合体系;步骤2.用细胞完全培养基将步骤1中无菌混合体系调至终浓度,同时加入用去离子水稀释的核酸片段,使形成的混合液终浓度达到要求;步骤3.用步骤2中的混合液悬浮细胞,等待细胞贴壁后,继续培养12h‑96h,期间步骤2中的混合液正常换液;步骤4.将细胞破碎,提取细胞质中生成好的产物,即可得到一种基于纳米金属单质或纳米金属合金与外源性核酸原位合成的三维结构。
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