[发明专利]蜂王浆主蛋白1、2、3的快速纯化方法有效
| 申请号： | 201910061845.4 | 申请日： | 2019-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN109608516B | 公开（公告）日： | 2020-11-27 |
| 发明（设计）人： | 霍新梅 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院蜜蜂研究所 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14;C07K1/18 |
| 代理公司： | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人： | 马进 |
| 地址： | 100093 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 蜂王浆主蛋白1、2、3的快速纯化方法，包括步骤：将蜂王浆溶于pH7的缓冲液A中，震荡过夜；取混合液进行低温离心，取上清用滤膜过滤；将上清上样到用缓冲液A平衡过的预装弱阳离子层析柱；以缓冲液A按照预定流速冲洗柱子，得蜂王浆主蛋白1；通过层析仪的梯度混合器将缓冲液A和缓冲液B按比例混合，并逐渐提高缓冲液B的比例，对柱子进行梯度洗脱，依次将结合在柱子上的蜂王浆主蛋白2和3洗脱下来。本发明的蜂王浆主蛋白1、2、3的快速纯化方法重复性好，产量高，操作简单、方便快捷，可级联放大，充分满足科研和规模化生产的需要，克服了传统分离方法存在的耗时费力、成本高、收率低等缺陷，优化了蜂王浆主蛋白的提取工艺。 | ||
| 搜索关键词： | 蜂王浆 蛋白 快速 纯化 方法 | ||
【主权项】：
1.蜂王浆主蛋白1、2、3的快速纯化方法，其特征在于，包括步骤：S1：将蜂王浆溶于pH7的缓冲液A中，震荡过夜；S2：取步骤S1中的蜂王浆与缓冲液A的混合液进行低温离心，之后取上清用滤膜过滤；S3：将步骤S2中过滤后的上清上样到用缓冲液A平衡过的预装弱阳离子层析柱；S4：以5‑10倍柱体积的缓冲液A按照1ml/min的流速冲洗柱子，得蜂王浆主蛋白1；S5：通过层析仪的梯度混合器将缓冲液A和pH7.5的缓冲液B按比例混合，以缓冲液A和缓冲液B的混合液按照1ml/min的流速对柱子进行梯度洗脱，并逐渐提高缓冲液B的比例，依次将结合在柱子上的蜂王浆主蛋白2和3洗脱下来。
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