[发明专利]DNA拓扑异构酶Ⅰ的制备方法和表达纯化方法在审
| 申请号： | 201910025199.6 | 申请日： | 2019-01-11 |
| 公开（公告）号： | CN109576254A | 公开（公告）日： | 2019-04-05 |
| 发明（设计）人： | 邹媛华;朱梦洁;王笃强 | 申请（专利权）人： | 吴江近岸蛋白质科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/90 | 分类号： | C12N9/90;C12N15/61;C12N15/70;C12Q1/533 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 215200 江苏省苏州*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了DNA拓扑异构酶Ⅰ的制备方法，该DNA拓扑异构酶Ⅰ的制备方法为构建DNA拓扑异构酶Ⅰ的原核表达载体，转入工程菌中，经培养后，获得表达菌株，然后进行表达纯化。本方采用重组蛋白制备技术，制备天花病毒的DNA拓扑异构酶Ⅰ，该蛋白具有识别特异性DNA序列5’‑(T/C)CCTT‑3’的特点，且制备过程简便，成本低，为DNA拓扑异构酶Ⅰ的研究和应用奠定基础。本发明有以下特点：产量高：可达到1mg/g菌体的收率；制备简便：两步纯化即获得纯度高，核酸残留检测合格的样品，工艺简便易于重复；具有位点特异性：能够切割特定序列且样品活性稳定。本发发明还提供了DNA拓扑异构酶Ⅰ的纯化方法。 | ||
| 搜索关键词： | 制备 原核表达载体 位点特异性 研究和应用 特异性DNA 表达菌株 残留检测 两步纯化 天花病毒 样品活性 制备过程 重组蛋白 工程菌 核酸 构建 菌体 收率 切割 蛋白 转入 重复 | ||
【主权项】：
1.DNA拓扑异构酶Ⅰ的制备方法，其特征在于，所述DNA拓扑异构酶Ⅰ的制备方法为构建DNA拓扑异构酶Ⅰ的原核表达载体，转入工程菌中，经培养后，获得表达菌株，然后进行表达纯化。
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