[发明专利]基于CRISPR/Cas9技术制备PI3Kγ全身敲除模式小鼠方法及其应用和试剂盒有效
| 申请号： | 201910021310.4 | 申请日： | 2019-02-18 |
| 公开（公告）号： | CN109694885B | 公开（公告）日： | 2021-03-02 |
| 发明（设计）人： | 万军;陈倩倩;陈崢;李毅 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军总医院 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N15/54;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京君恒知识产权代理有限公司 11466 | 代理人： | 郑黎明 |
| 地址： | 100853 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种基于CRISPR/Cas9技术制备PI3Kγ全身敲除模式小鼠方法及其应用和试剂盒，所述方法包括以下步骤：设计识别基因PI3Kγ的sgRNA；将sgRNA连入质粒载体上并进行体外转录，得到可进行显微注射的RNA；将可进行显微注射的RNA注射到小鼠受精卵中，注射后小鼠出生；对小鼠进行基因型鉴定，选取其中PI3Kγ全身敲除基因型检测结果为阳性小鼠与野生型交配，获得具有稳定基因型的PI3Kγ全身敲除模式小鼠。本发明与传统基因敲除技术相比，更易于操作，效率更高，更容易得到纯合子突变，为进一步研究PI3Kγ的功能打下良好的基础。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 crispr cas9 技术 制备 pi3k 全身 模式 小鼠 方法 及其 应用 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.基于CRISPR/Cas9技术制备PI3Kγ全身敲除模式小鼠的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：设计识别基因PI3Kγ的sgRNA；将sgRNA连入质粒载体上并进行体外转录，得到可进行显微注射的RNA；将可进行显微注射的RNA注射到小鼠受精卵中，注射后小鼠出生；对小鼠进行基因型鉴定，选取其中PI3Kγ全身敲除基因型检测结果为阳性小鼠与野生型交配，获得具有稳定基因型的PI3Kγ全身敲除模式小鼠。
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