[发明专利]扩增DNA以维持甲基化状态的方法在审
| 申请号： | 201880029791.7 | 申请日： | 2018-03-08 |
| 公开（公告）号： | CN110741092A | 公开（公告）日： | 2020-01-31 |
| 发明（设计）人： | 曹云龙;X·S·谢 | 申请（专利权）人： | 哈佛学院董事及会员团体 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34;C12Q1/6827;C12Q1/6886 |
| 代理公司： | 31100 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人： | 陶家蓉;杨昀 |
| 地址： | 美国马*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本发明提供了一种制备扩增的甲基化组的方法，所述方法通过延伸片段和用甲基转移酶和甲基源处理延伸的片段，将半甲基化的双链DNA转化成完全甲基化的双链DNA，来制备扩增的甲基化组。 | ||
| 搜索关键词： | 甲基化组 双链DNA 扩增 制备 甲基转移酶 半甲基化 甲基化 延伸 转化 | ||
【主权项】：
1.一种制备扩增的甲基化组的方法，所述方法包括：/n(a)片段化具有甲基化模式的双链DNA序列，以产生片段模板双链DNA序列，其具有甲基化模式且在片段模板双链DNA序列的各5’末端和3’末端具有引物结合位点,/n(b)将片段模板双链DNA序列分成上模板链和下模板链,/n(c)用引物、聚合酶和核苷酸延伸上模板链和下模板链，产生未甲基化的互补链，得到半甲基化的双链DNA序列，其对应于具有甲基化模式的片段模板双链DNA序列,/n(d)用甲基转移酶和甲基源处理半甲基化双链DNA序列以在对应于相应片段化模板双链DNA序列的甲基化胞嘧啶的位置加上甲基，以产生完全甲基化的片段模板双链DNA序列；和/n(e)重复步骤(b)到(d)产生片段模板双链DNA序列的完全甲基化扩增子。/n
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