[发明专利]一种橘青霉发酵液中还原糖的检测方法

摘要

本发明涉及检测技术领域，公开了一种微生物发酵液中还原糖的检测方法，包括最佳DNS溶液配方选择的方法、最适反应时间选择和最优紫外测定波长确定。本发明使用DNS还原显色的方法检测橘青霉发酵液中还原糖的含量，通过还原糖含量的变化，判断橘青霉生长状态和生长环境，实现发酵生产过程中的有效控制，该方法简单易操作。本发明使用3,5‑二硝基水杨酸显色代替传统的碘酸滴定，还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5‑二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3‑氨基‑5‑硝基水杨酸，在碱性溶液中此化合物呈橘红色，在一定的浓度范围内还原糖的量与光吸收值呈线性关系，利用比色法可测定样品中的还原糖的含量。本发明的检测方法可以定量检测橘青霉发酵液中还原糖含量，容易操作，准确性和稳定性高。

主权项

1.一种橘青霉发酵液中还原糖的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取待测橘青霉发酵液与显色试剂DNS溶液混合，得到混合液，所述DNS溶液的配方如下：0.028mol/L 3,5‑二硝基水杨酸、2mol/L NaOH、0.914mol/L酒石酸钾钠、0.053mol/L苯酚、0.040mol/L亚硫酸钠；(2)在DNS溶液中加入与待测样品等体积的去离子水，作为空白对照；(3)将步骤(1)得到的混合液和空白对照在沸水浴中加热，再冷却至室温，在最适紫外波长处测定吸光度；按下式计算橘青霉发酵液中还原糖含量：还原糖浓度(mg/ml)＝X*N式中A为混合反应样测得紫外吸光度；B为空白样测得紫外吸光度；X为由(B‑A)查得葡萄糖标准曲线还原糖的毫克数mg；N为稀释倍数N。