[发明专利]一种含木瓜蛋白酶的铁-铜复合磁性纳米花及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种含木瓜蛋白酶的铁‑铜复合磁性纳米花及其制备方法和应用，属于酶固定化领域。一种含木瓜蛋白酶的铁‑铜复合磁性纳米花的制备方法，该方法是将氨基修饰的磁性Fe3O4纳米粒子溶液与木瓜蛋白酶溶液混合后，再加入铜离子无机盐溶液，得到含木瓜蛋白酶的铁‑铜复合磁性纳米花。本发明合成的木瓜蛋白酶铁‑铜复合磁性纳米花与游离酶相比具有更大的比表面积，进而减少了酶与底物间的传质阻碍，固定化后的木瓜蛋白酶的酶活是游离酶的25倍左右。

主权项

1.一种含木瓜蛋白酶的铁‑铜复合磁性纳米花的制备方法，其特征在于：该方法是将氨基修饰的磁性Fe₃O₄纳米粒子溶液与木瓜蛋白酶溶液混合后，再加入铜离子无机盐溶液，得到含木瓜蛋白酶的铁‑铜复合磁性纳米花，所述氨基修饰的磁性Fe₃O₄纳米粒子按下述方法制得：将100～500mg磁性Fe₃O₄纳米粒子加入100g浓度为400mmol/L的尿素水溶液中超声，然后按照摩尔比为2:10:6:14:1的比例分别加入溴化十六烷基三甲基铵、正丁醇、环己烷、正硅酸乙酯和3‑氨丙基三乙氧基硅烷，搅拌均匀后在40～70℃条件下反应24小时，其中，十六烷基三甲基溴化铵为1.25g；然后，在60～80℃条件下用丙酮回流24小时，收集沉淀，经过洗涤、磁性分离、冷冻干燥得到氨基修饰的磁性Fe₃O₄纳米粒子。