[发明专利]可视化的离子通道蛋白bR可溶性融合表达载体及其构建方法在审
| 申请号： | 201811556737.6 | 申请日： | 2018-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN109652433A | 公开（公告）日： | 2019-04-19 |
| 发明（设计）人： | 宁金凤;周敏;冯昕妍;王犇 | 申请（专利权）人： | 南京理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/66;C12N15/62 |
| 代理公司： | 南京理工大学专利中心 32203 | 代理人： | 刘海霞 |
| 地址： | 210094 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种可视化的离子通道蛋白bR可溶性融合表达载体及其构建方法。所述载体通过分别构建细菌视紫红质的可溶化表达载体pET28a‑ΔspMBP‑bR‑ApoAI*‑His和高度折叠的绿色荧光蛋白表达载体pET28a(+)‑sfGFP载体，经酶切将bR‑ApoAI*‑His整合到pET28a(+)‑sfGFP载体中，得到可视化的离子通道蛋白bR可溶性融合表达载体pET28a(+)‑sfGFP‑bR‑ApoAI*‑His载体。本发明构建的融合表达载体能够实现细菌视紫红质的水可溶性和可视化表达，并且表达量较高。 | ||
| 搜索关键词： | 融合表达载体 可视化 构建 离子通道蛋白 细菌视紫红质 表达载体 绿色荧光蛋白 水可溶性 表达量 折叠的 溶化 酶切 整合 | ||
【主权项】：
1.可视化的离子通道蛋白bR可溶性融合表达载体，其特征在于，利用PCR扩增pET19b‑sfGFP质粒，得到sfGFP，将sfGFP整合到pET28a(+)质粒中得到pET28a(+)‑sfGFP载体；PCR扩增pMBP‑p质粒，得到除去N端信号肽的麦芽糖结合蛋白cDNA即ΔspMBP，将ΔspMBP整合到pET28a(+)质粒中得到pET28a(+)‑ΔspMBP载体；PCR扩增pET28a(+)‑ApoAI质粒，得到截短的人类载脂蛋白cDNA即ApoAI*，将ApoAI*整合到pET28a(+)‑ΔspMBP载体中得到pET28a(+)‑ΔspMBP‑ApoAI*‑His载体；PCR扩增密码子优化过的细菌视紫红质合成基因，将其整合到pET28a(+)‑ΔspMBP‑ApoAI*‑His载体中，得到细菌视紫红质的可溶化表达载体pET28a‑ΔspMBP‑bR‑ApoAI*‑His；酶切ΔspMBP‑bR‑ApoAI*‑His，得到bR‑ApoAI*‑His，将bR‑ApoAI*‑His整合到pET28a(+)‑sfGFP载体中得到可视化的离子通道蛋白bR可溶性融合表达载体即pET28a(+)‑sfGFP‑bR‑ApoAI*‑His载体。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京理工大学，未经南京理工大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201811556737.6/，转载请声明来源钻瓜专利网。
