[发明专利]一种以果渣、酒糟为原料的生物饲料混菌发酵方法

摘要

本发明提供了一种以果渣、酒糟为原料的生物饲料混菌发酵方法，属于工业副产物再利用领域。本发明的方法由种子液的制备、混菌发酵液的制备、混菌发酵液的刺激处理以及生物饲料的制备这几个步骤组成。本发明首次采用食用真菌双孢菇和霉菌、酵母菌进行混菌发酵，在适宜的培养条件下使各菌种互利共生，共同完成代谢活动，极大地提高了发酵效率和原料的转化率，显著提升了发酵饲料的营养价值。本发明还采用液固态发酵模式，结合两种模式的优点对果渣、酒糟进行综合利用，为生物饲料的规模化生产提供了方向。

主权项

1.一种以果渣、酒糟为原料的生物饲料混菌发酵方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）种子液的制备双孢菇：用接种铲从已活化的双孢菇斜面菌种上铲取3‑4块0.5cm2的菌块接种至装有种子液培养基的锥形瓶中，装液量为100mL/250mL，在26℃恒温摇床上振荡培养3‑4d，摇床转速140r/min，制得双孢菇种子液；里氏木霉：将里氏木霉菌种接种到PDA培养基斜面上，在28℃恒温培养箱中培养，长出孢子后用无菌生理盐水将孢子洗下，制成浓度为1×107个/ml的孢子悬液，按5%接种量接种到装有PDB培养基的锥形瓶中，装液量为70mL/250mL，在28℃恒温摇床上振荡培养36‑48h，摇床转速120r/min，制得里氏木霉种子液；酿酒酵母：将酿酒酵母菌种接种到麦芽汁琼脂培养基斜面上，在28℃恒温培养箱中培养72h，再接种到麦芽汁液体培养基中，装液量为100mL/250mL，在28℃恒温摇床上振荡培养48‑72h，摇床转速160r/min，制得酿酒酵母种子液；（2）混菌发酵液的制备按照5%的接种量将双孢菇种子液接种到装有液体培养基的发酵罐中，通入净化空气后开始发酵培养，发酵罐装液量为55‑65%，液体培养基起始pH调节为6.5左右，培养2d后，按照3%和2%的接种量将米曲霉和酿酒酵母种子液一起接入，继续培养3‑4d，制得混菌发酵液；（3）混菌发酵液的刺激处理接种前将混菌发酵液盛于锥形瓶中进行刺激处理，先采用超声波生物刺激生长仪处理40min，再采用特定电磁波治疗仪处理20min；（4）生物饲料的制备按照15%的接种量将处理后的混菌发酵液接种到以果渣、酒糟为原料的固体培养基上，固体培养基无需灭菌，初始pH调节为6.5左右，料水比调节为1:1左右，搅拌均匀后在温度27‑29℃的条件下发酵6‑7d，发酵期间注意保持室内通风，发酵结束后将固体产物在45℃下烘干、粉碎，制得生物饲料。