[发明专利]一种提高肿瘤渗透滞留效应的功能化氧化石墨烯药物复合物的制备方法及应用

摘要

本发明涉及一种提高肿瘤渗透滞留效应的功能化氧化石墨烯药物复合物的制备方法及应用，可有效解决提高肿瘤渗透滞留效应，保证癌症治疗效果的用药问题；技术方案是将氧化石墨烯与氢氧化钠和氯乙酸反应形成羧基化的氧化石墨烯，通过酰胺化反应在聚乙二醇的一端分别修饰多肽链和2‑氰基‑6‑氨基‑苯并噻唑，再通过酰胺化反应将修饰过的聚乙二醇连接在羧基化的氧化石墨烯上形成混合给药系统，最后通过π‑π吸附负载抗癌药物；本发明操作方便，稳定可靠，所制得的氧化石墨烯药物复合物具有生物相容性好、渗透作用强、滞留时间长、能显著杀伤肿瘤，在肿瘤治疗方面可发挥靶向、光热治疗、免疫治疗等多重功效，是肿瘤治疗药物上的创新。

主权项

1.一种提高肿瘤渗透滞留效应的功能化氧化石墨烯药物复合物的制备方法，其特征在于，将氧化石墨烯与氢氧化钠和氯乙酸反应形成羧基化的氧化石墨烯，通过酰胺化反应在聚乙二醇的一端分别修饰多肽链和2‑氰基‑6‑氨基‑苯并噻唑，再通过酰胺化反应将修饰过的聚乙二醇连接在羧基化的氧化石墨烯上形成混合给药系统，最后通过π‑π吸附负载抗癌药物；具体包括以下步骤：（1）制备羧基化氧化石墨烯：取氧化石墨烯 5‑10mg溶于5ml超纯水中，加入氢氧化钠0.6‑1.2g，氯乙酸0.5‑1.0g，冰浴探超3h；加入浓盐酸调节pH为6.5‑7.5，用MWCO为3500的透析袋透析2天，得羧基化氧化石墨烯水溶液；（2）制备多肽链修饰的聚乙二醇：称取NH2‑PEG‑COOH 8‑10mg溶于2‑5mL 溶剂中，加入1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐2‑5mg，N‑羟基琥珀酰亚胺1‑3mg，室温反应15‑30min；加入多肽链1‑3mg，室温反应12‑24h，用MWCO为1000的透析袋透析2天，得多肽链修饰的聚乙二醇；所述的多肽链为含有Cys‑Asn‑Ala‑Ala序列的多肽链；所述溶剂为超纯水，pH=7.4的PBS缓冲液，pH=5.6的MES缓冲液，无水乙醇，DMSO或甲酰胺的一种；（3）制备2‑氰基‑6‑氨基‑苯并噻唑修饰的聚乙二醇：称取NH2‑PEG‑COOH 8‑10mg溶于2‑5mL 溶剂中，加入1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐2‑5 mg，N‑羟基琥珀酰亚胺1‑3 mg，室温反应15‑30min，加入CABT 0.2‑0.5mg，室温反应12‑24h，用MWCO为1000的透析袋透析2天，得2‑氰基‑6‑氨基‑苯并噻唑修饰的聚乙二醇；所述溶剂为超纯水，pH=7.4的PBS缓冲液，pH=5.6的MES缓冲液，无水乙醇，DMSO或甲酰胺的一种；（4）制备多肽链修饰的氧化石墨烯：取步骤（1）制备的羧基化氧化石墨烯水溶液1‑5mL，加入步骤（2）制备的多肽链修饰的聚乙二醇 5‑10mg，冰浴探超5min，加入1‑5mg EDC，继续冰浴探超25min，再加入1‑5mg EDC，室温搅拌24h，用MWCO为10000的透析袋透析2天，得多肽链修饰的氧化石墨烯；（5）制备2‑氰基‑6‑氨基‑苯并噻唑修饰的氧化石墨烯：取步骤（1）制备的羧基化氧化石墨烯水溶液1‑5mL，加入步骤（3）制备的2‑氰基‑6‑氨基‑苯并噻唑修饰的聚乙二醇5‑10mg，冰浴探超5min，加入1‑5mg EDC，继续冰浴探超25min，再加入1‑5mg EDC，室温搅拌24h，用MWCO为10000的透析袋透析2天，得2‑氰基‑6‑氨基‑苯并噻唑修饰的氧化石墨烯；（6）制备负载抗癌药物的复合纳米药物：取步骤（4）制备的多肽链修饰的氧化石墨烯 2‑5mg和步骤（5）制备的2‑氰基‑6‑氨基‑苯并噻唑修饰的氧化石墨烯2‑5mg溶于2‑5mL超纯水中，取抗癌药物 2‑5mg溶于0.2‑0.5mL的溶剂中，逐滴加入功能化的氧化石墨烯水溶液中，冰浴探超1‑3min，室温搅拌12‑24h，1000‑3000rmp离心5‑10min，取上清液与MWCO为1000的透析袋中透析4h，产物进行冷冻干燥，得提高肿瘤渗透滞留效应的功能化氧化石墨烯药物复合物；所述抗癌药物为阿霉素、紫杉醇、吉西他滨或奥沙利铂中的一种；所述溶剂为超纯水，pH=7.4的PBS缓冲液，pH=5.6的MES缓冲液，无水乙醇，DMSO或甲酰胺的一种。