[发明专利]一种基于小型鱼类胚胎的美白效果评价方法在审
| 申请号： | 201811511740.6 | 申请日： | 2018-12-11 |
| 公开（公告）号： | CN109797187A | 公开（公告）日： | 2019-05-24 |
| 发明（设计）人： | 赵海山;宋来思;谭文 | 申请（专利权）人： | 广东工业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02;G01N21/31 |
| 代理公司： | 广东广信君达律师事务所 44329 | 代理人： | 杨晓松 |
| 地址： | 510062 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明涉及一种美白效果评价方法，具体涉及一种基于小型鱼类胚胎的美白效果评价方法。本发明将待测样品加入孵化液中，待测样品将渗透入幼鱼的皮肤，然后取出幼鱼，研磨获得组织匀浆，离心，收集沉淀，使用适量纯水重悬，利用渗透压破碎细胞，释放出细胞内黑色素，得到检测液；使用酶标仪或分光光度计进行检测，与未使用化合物的空白对照进行对比，评价待测样品美白效果。本发明采用上述方法对阳性药物α‑熊果苷等化合物进行评价，结果显示可以定量分析α‑熊果苷的体内美白效果，具有明显剂量依赖性。该方法可在整体动物水平中，定量评价美白效果，实验周期短，成本低廉，可同时进行体内毒性评价，适用于化妆品美白原料的大规模筛选和开发。 | ||
| 搜索关键词： | 美白效果 待测样品 小型鱼类 熊果苷 幼鱼 胚胎 整体动物水平 大规模筛选 分光光度计 剂量依赖性 定量分析 定量评价 空白对照 破碎细胞 实验周期 体内毒性 阳性药物 组织匀浆 研磨 孵化液 黑色素 检测液 酶标仪 渗透压 未使用 美白 重悬 化妆品 沉淀 取出 皮肤 体内 细胞 释放 检测 开发 | ||
【主权项】：
1.一种基于小型鱼类胚胎的美白效果评价方法，其特征在于包含如下步骤：(1)挑选斑马鱼健康受精卵，将其置于Holtfreter’s Solution中，25～32℃恒温培养至24hpf，培养密度不超过10胚胎/cm2，避免密度过高引起的死亡；(2)将步骤(1)中发育至24hpf的健康胚胎转移至含有Holtfreter’s Solution的24孔板中，每孔20～30枚胚胎；然后在24孔板各孔中，加入不同浓度待测样品，25～32℃恒温培养至48hpf；(3)将步骤(2)中培养至48hpf的胚胎进行破碎匀浆，得到匀浆液；离心，弃去上清，收集沉淀；(4)将步骤(3)制得的沉淀用纯水重悬，得到检测液，然后在400～450nm波长处检测吸光度，进行相对定量，或者利用标准品进行绝对定量。
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