[发明专利]基于非线性化学指纹图谱鉴别小米产地的方法

摘要

本发明属于小米鉴别技术领域，特别涉及一种基于非线性化学指纹图谱鉴别小米产地的方法；该方法先通过对不同产地的小米样品进行预处理，预处理的过程中，在pH为6.0‑7.0水温为48‑50℃的条件下先通过木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和风味蛋白酶对小米将进行酶解处理，通过使用高峰α‑淀粉酶、β‑淀粉酶和葡萄糖淀粉酶使得小米中的淀粉被充分的酶解成还原性糖；在H+、BrO3‑、Mn2+和CH3COCH3组成的B‑Z电化学振荡体系混合，在恒温下测试电势的变化，根据电化学指纹图谱的提取特征参数，获得丰富的信息，利用相似系统理论，将待鉴样本与标准样本进行比较，根据整体相似度鉴别待鉴样本的真伪，防止不法商贩用普通小米冒充知名产地的小米，极大地方便了我们的生活。

主权项

1.基于非线性化学指纹图谱鉴别不同产地小米的方法，其特征在于，包括如下步骤：A、建立前处理后的化学成分的非线性化学指纹图谱：Ⅰ、样品前处理：S1、将小米进行粉碎处理，并过80目筛，然后浸泡在温度为50‑65℃的水中，浸泡时间为120‑160min，然后进行打浆处理，所得记为小米浆；S2、向S1中所得的小米浆中加入质量为其0.3‑0.7%的混合蛋白酶并调节pH为6.0‑7.0然后置于超声波细胞破碎仪中破碎处理4‑8min后，调节水温为48‑50℃，保温浸泡5‑9h，所得记为混合组分A；S3、向混合组分A中加入质量为其0.4‑0.7%的复合淀粉酶，并调节混合组分的pH值为5.8‑6.5，调节水温为50‑55℃，超声分散4‑8min后保温浸泡25‑40min；然后升温至80‑85℃，超声分散5‑10min后保温浸泡30‑50min，再将温度升至95‑100℃，保温25‑40min；S4、将S3所得进行真空减压排气，然后再将混合组分B移入离心分离机中离心200‑260s后再经过滤处理，弃去滤渣，所得滤液记为混合组分B；Ⅱ、绘制前处理后的样品的非线性指纹图；准确量取10mL混合组分B并移至微波水解石英杯中，然后向其中加入10mL浓度为4.0moL/L硫酸溶液，盖好石英杯，并将石英杯放入密封装置中，拧紧，插入温度传感器，抽真空，充入高纯氮气以保护样品，重复3次；在800W功率条件下，不同水解温度下水解不同时间，当温度冷却至室温后打开密封装置，取出水解槽，将微波水解瓶逐一取下后，将水解液转移至倒入带有磁力搅拌器的恒温水浴杯中，相继加入12ml，0.080mol/L的硫酸锰溶液与5ml，1mol/L的丙酮溶液作为反应底液，并开启磁力搅拌器，调节转速为500r/min；在另一个恒温水浴杯中加入10ml浓度为0.4mol/L的溴酸钾溶液，待在37℃的温度下恒温10min后，将溴酸钾溶液倒入反应底液，并用电化学工作站记录电压‑时间曲线，以绘制出前处理后的样品的非线性化学指纹图；B、检测样品：取待检测的前处理后的样品，使用与标准样品相同的前处理条件，得出检测样品的图谱，将两者的指纹图谱用直接观察并且以Origin软件分析作为定性依据；C、重现性考察：取待检测的前处理后的样品，测定其图谱，测得的非线性化学指纹图谱的各种特征参数的RSD＜3％，表明所述方法具有很好的重现性；进一步，所述指纹法包括如下步骤：A‑1、标准样品选择：同一产地同一品牌的小米，以4‑8个批次为标准样品；A‑2、非线性指纹法图谱分析条件：检测仪器：瑞士万通204N型电化学工作站，HH‑501型超级恒温水浴锅，85‑2A型数显恒温磁力搅拌器，213型金属铂电极，217型甘汞电极；温度(310±0.05)K；黑龙江肇东龙谷25、河北张家口桃花米、内蒙古赤峰小米、辽宁朝阳大金苗、山东章丘龙山米、陕西米脂小米、山西沁州黄小米七个不同产地的小米、10ml浓度为4.0mol/L硫酸溶液、12ml浓度为0.08mol/L的硫酸锰溶液、5ml浓度为1.0mol/L的丙酮溶液，10ml浓度为0.4mol/L的溴酸钾溶液；A‑3、非线性化学指纹图谱信息参数分析：用Origin软件绘制电压‑时间（E‑t）曲线，即获得不同产地小米的非线性化学指纹图谱以及其特征参数；其中，图谱参数包括：诱导时间(s)：从加入试剂到振荡发生的时间；振荡寿命(s)：振荡开始到振荡结束的时间；最大振幅(v)：振荡过程中相邻电位正峰和负峰之间的最大差值；最高电位(v)；振荡曲线的电位最高值；最低电位(v)；振荡曲线的电位最低值；平衡电位(v)；体系达到热力学平衡时的电位；测得的非线性化学指纹图谱的各种特征参数的RSD＜3％；B、检测样品：取待检测的前处理后的样品，使用与标准样品相同的条件检测，得出检测样品的指纹图谱，将两者的指纹图谱直接观察并且以Origin软件分析作为定性依据，如果两者的图谱系统的相似度大于97%，可认为是同一产地同一产品，若相似度小于97%，则认为不是同一地区同一产品；C、重现性考察：取6份待测前处理后的样品，测定其图谱并进行考察。