[发明专利]基于Illumina测序的串联条形码、其标记的DNA文库及其构建方法有效
申请号: | 201811406204.X | 申请日: | 2018-11-23 |
公开(公告)号: | CN109486924B | 公开(公告)日: | 2022-03-01 |
发明(设计)人: | 李晨虹;王颖;袁昊 | 申请(专利权)人: | 上海海洋大学 |
主分类号: | C12Q1/6869 | 分类号: | C12Q1/6869;C12Q1/6806;C12N15/11;C40B50/06 |
代理公司: | 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司 31227 | 代理人: | 胡永宏 |
地址: | 201306 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了基于Illumina测序的串联条形码、其标记的DNA文库及其构建方法,包括样本DNA序列破碎、修复序列平末端、序列末端加上串联条形码接头、修复序列空缺并延伸和PCR扩增的步骤构建DNA文库;其中串联条形码为6bp长度的DNA序列,且同时满足最小编辑长度3以内、包含不同碱基的片段、使用不同激光色的碱基且相邻碱基激光色不同和不含有AAA、ACA、CCC、CAC、GGG、GTG、TTT和TGT的碱基序列。通过提前引入串联条形码进行DNA标记,大大减少污染数据不能被识别的可能性,极大改善在DNA文库构建和基因富集过程中非常普遍的样本之间相互污染问题。 | ||
搜索关键词: | 基于 illumina 串联 条形码 标记 dna 文库 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
1.基于Illumina测序的串联条形码,其特征在于,所述串联条形码为6bp长度的DNA序列,且同时满足(ⅰ)最小编辑长度3以内,和(ⅱ)包含不同碱基的片段,和(ⅲ)使用不同激光色的碱基,且相邻碱基激光色不同,和(ⅳ)不含有'AAA'、'ACA'、'CCC'、'CAC'、'GGG'、'GTG'、'TTT'和'TGT'的碱基序列。
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