[发明专利]基于CRISPR-Cas9靶向基因组修饰技术构建Egr2-Luciferase-KI-HEK293细胞系方法在审
| 申请号： | 201811383456.5 | 申请日： | 2018-11-20 |
| 公开（公告）号： | CN109797166A | 公开（公告）日： | 2019-05-24 |
| 发明（设计）人： | 夏海滨;曹坤坤 | 申请（专利权）人： | 陕西师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/90;C12N15/12;C12N5/10 |
| 代理公司： | 西安恒泰知识产权代理事务所 61216 | 代理人： | 李郑建 |
| 地址： | 710062 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于CRISPR‑Cas9靶向基因组修饰技术构建Egr2‑Luciferase‑KI‑HEK293细胞系的方法，将靶向Egr2基因的打靶载体与打靶供体共转HEK293细胞系，使携带荧光素酶报告基因的打靶载体在Egr2基因组下游目标位点处正确重组，重组基因受内源性Egr2基因启动子的调控，获得单一稳定的Egr2‑Luciferase‑KI‑HEK293细胞系，并验证Egr2‑Luciferase‑KI‑HEK293细胞系中Luciferase表达变化是否能真实反映内源性Egr2基因的相对表达量及表达变化。为毛发生长和中枢神经系统相关研究提供一种新的实验思路及解决方案。 | ||
| 搜索关键词： | 靶向 基因组修饰 表达变化 打靶载体 技术构建 内源性 荧光素酶报告基因 中枢神经系统 基因启动子 相对表达量 毛发生长 实验思路 下游目标 重组基因 基因 基因组 供体 位点 验证 携带 调控 研究 | ||
【主权项】：
1.一种基于CRISPR‑Cas9靶向基因组修饰技术构建Egr2‑Luciferase‑KI‑HEK293细胞系的方法，其特征在于，将靶向Egr2基因的打靶载体与打靶供体共转HEK293细胞系，使携带荧光素酶报告基因的打靶载体在Egr2基因组下游目标位点处正确重组，重组基因受内源性Egr2基因启动子的调控，获得单一稳定的Egr2‑Luciferase‑KI‑HEK293细胞系，并验证Egr2‑Luciferase‑KI‑HEK293细胞系中Luciferase表达变化是否可以真实反映内源性Egr2基因的相对表达量及表达变化。
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