[发明专利]一种中国辣椒带柄子叶诱导再生植株的方法

摘要

本发明公开了一种中国辣椒带柄子叶诱导再生植株的方法，包括无菌苗的获取、不定芽的诱导、不定芽的伸长、不定芽的生根和移栽等步骤。灭菌后的种子接种在不添加植物激素的MS培养基上，选取适宜苗龄无菌苗的带柄子叶作为外植体，利用研究得到的诱导不定芽培养基产生不定芽，使得诱导分化率提高；利用研究得到的伸长培养基，使不定芽的伸长诱导率得到了很大的提升；生根培养基有利于不定根的诱导，从而提高了再生植株的成活率。采用中国辣椒带柄子叶作为外植体，结合筛选的诱导不定芽培养基、不定芽伸长培养基和生根培养基，显著提高了诱芽率和生根率，本发明构建的离体再生体系，为中国辣椒遗传转化的研究奠定了基础。

主权项

1.一种中国辣椒带柄子叶诱导再生植株的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)无菌苗的获取：取中国辣椒的种子放置在过滤器上，然后放入培养瓶中，加入无菌水，水浴加热后，进行灭菌处理，最后将灭菌处理后的种子吸干水分，接种至不添加植物激素的MS培养基上，光照培养得到无菌苗；(2)不定芽的诱导：取培养13～17d生长正常的无菌苗，切取0.5～1cm带柄子叶作为外植体，接种到灭菌后的诱导不定芽培养基中，进行不定芽的诱导培养，带柄子叶周围生成不定芽；(3)不定芽的伸长：将分化出2～3cm的不定芽切分，转移至伸长培养基中培养；(4)不定芽的生根：将步骤(3)中培养伸长至3～5cm的不定芽切分，接种至生根培养基中诱导生根；(5)移栽：待生根苗株高为8～12cm后，去瓶盖培养1～2d，将生根苗株从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入品式泥炭土，置于光照培养箱内培养，保持土壤湿润，幼苗成活后移栽至大田。