[发明专利]一种中国辣椒带柄子叶诱导再生植株的方法

权利要求书

1.一种中国辣椒带柄子叶诱导再生植株的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)无菌苗的获取：取中国辣椒的种子放置在过滤器上，然后放入培养瓶中，加入无菌水，置于50～60℃水浴锅中加热20～40min，进行灭菌处理，其中灭菌处理先用70％～80％乙醇震荡处理1～3min，然后用无菌水冲洗，再加入3％～5％次氯酸钠溶液进行震荡摇晃10～20min，接着无菌水冲洗3～6次；最后将灭菌处理后的种子吸干水分，接种至不添加植物激素的MS培养基上，光照培养得到无菌苗，光照培养时间为14～18h，光照培养强度为2000～2500lux；

(2)不定芽的诱导：取培养13～17d生长正常的无菌苗，切取0.5～1cm带柄子叶作为外植体，接种到灭菌后的诱导不定芽培养基中，进行不定芽的诱导培养，带柄子叶周围生成不定芽；所述诱导不定芽培养基的灭菌为将诱导不定芽培养基置于高压蒸汽灭菌锅内，在115～121℃下灭菌15～30min；所述诱导不定芽培养基为MS+6-BA 3.0mg/L+IAA 0.1mg/L，诱导培养15～25d；

(3)不定芽的伸长：将分化出2～3cm的不定芽切分，转移至伸长培养基中培养；所述伸长培养基为MS+6-BA 3.0mg/L+IAA 1.0mg/L+GA₃ 4.0mg/L，培养10～20d，所述GA₃置于除菌过滤器内过滤灭菌， 待培养基冷却至55～60℃后使用；

(4)不定芽的生根：将步骤(3)中培养伸长至3～5cm的不定芽切分，接种至生根培养基中诱导生根；所述生根培养基为1/2MS+IAA 0.2mg/L，培养两周后长出8～12条粗壮的根系；

(5)移栽：待生根苗株高为8～12cm后，去瓶盖培养1～2d，将生根苗株从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入品式泥炭土，置于光照培养箱内培养，所述培养箱内温度为24～26℃，保持土壤湿润，幼苗成活后移栽至大田；

以上所述MS培养基为含琼脂和蔗糖的培养基。