[发明专利]一种流穿层析法纯化b型嗜血杆菌荚膜多糖的工艺在审
申请号: | 201811352452.0 | 申请日: | 2018-11-14 |
公开(公告)号: | CN109627351A | 公开(公告)日: | 2019-04-16 |
发明(设计)人: | 高磊;苏晓叶;石献华;程亚君;李倩 | 申请(专利权)人: | 北京智飞绿竹生物制药有限公司;重庆智飞生物制品股份有限公司;安徽智飞龙科马生物制药有限公司 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00 |
代理公司: | 北京华科联合专利事务所(普通合伙) 11130 | 代理人: | 王为;孟旭 |
地址: | 100176 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供一种流穿层析法纯化b型嗜血杆菌荚膜多糖的工艺,包括预处理、串联DEAE‑adhere复合模式层析柱层析、切向流超滤膜包超滤、冷冻干燥步骤。本发明的优点在于减少有机溶媒的使用,减少了对环境及人员的危害。层析柱流穿模式层析配合切向流超滤膜包脱盐使杂质含量更低,且更具生产放大的意义;示差检测器的应用解决了多糖对紫外波长无响应的问题;超滤液直接冷冻干燥获得低含水量的多糖产品,精糖更稳定性。 | ||
搜索关键词: | 切向流超滤膜 荚膜多糖 嗜血杆菌 穿层 预处理 冷冻干燥步骤 层析柱层析 示差检测器 低含水量 多糖产品 复合模式 有机溶媒 紫外波长 层析柱 超滤液 层析 超滤 精糖 脱盐 串联 放大 响应 应用 配合 生产 | ||
【主权项】:
1.一种流穿层析法纯化b型嗜血杆菌荚膜多糖的工艺,包括以下步骤:1)预处理:将粗多糖充分溶解于Tris缓冲液中,向溶液中添加等体积的脱氧胆酸钠溶液,搅拌6小时以后中空纤维柱过滤,获得过滤液;2)层析:过滤液通过DEAE柱与adhere柱串联的层析柱,收集流穿的层析液;3)超滤:使用切向流超滤膜包对层析液进行超滤脱盐、浓缩,获得浓缩液;4)冷冻干燥:将浓缩液冷冻干燥,获得絮状固体b型嗜血杆菌的荚膜多糖。
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