[发明专利]一种烟草蛋白激酶基因NtCIPK25-1及其克隆方法与应用在审
申请号: | 201811347473.3 | 申请日: | 2018-11-13 |
公开(公告)号: | CN109468334A | 公开(公告)日: | 2019-03-15 |
发明(设计)人: | 高玉龙;李梅云;王丙武;宋中邦;焦芳婵;吴兴富;李文正;赵璐;李永平 | 申请(专利权)人: | 云南省烟草农业科学研究院 |
主分类号: | C12N15/54 | 分类号: | C12N15/54;C12N9/12;C12N15/10;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82 |
代理公司: | 昆明知道专利事务所(特殊普通合伙企业) 53116 | 代理人: | 姜开侠;谢乔良 |
地址: | 650021*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明公开了一种烟草蛋白激酶基因NtCIPK25‑1及其克隆方法与应用;所述的烟草蛋白激酶基因NtCIPK25‑1核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;克隆方法包括烟草叶片cDNA合成:提取烟草叶片总RNA,反转录得到第一链cDNA;NtCIPK25‑1基因的PCR扩增:以烟草叶片cDNA为模板,根据NtCIPK25‑1基因序列设计引物,进行PCR扩增,回收和纯化PCR扩增产物,并测序。应用为所述的烟草蛋白激酶基因NtCIPK25‑1在获得调控烟草钾含量的转基因烟草植株中的应用。本发明利用CRISPR/CAS9技术对克隆的NtCIPK25‑1基因进行了功能鉴定。烟草NtCIPK25‑1基因的克隆鉴定为调控烟草钾含量提供了新的基因靶标。 | ||
搜索关键词: | 激酶基因 烟草蛋白 烟草叶片 克隆 烟草 应用 基因 转基因烟草植株 氨基酸序列 第一链cDNA 核苷酸序列 编码蛋白 功能鉴定 基因靶标 基因序列 克隆鉴定 设计引物 反转录 总RNA 调控 测序 回收 | ||
【主权项】:
1.一种烟草蛋白激酶基因NtCIPK25‑1,其特征在于所述的烟草蛋白激酶基因NtCIPK25‑1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
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