[发明专利]一种快速、低成本从鸡血中分离PCR模板的方法在审
| 申请号： | 201811326872.1 | 申请日： | 2018-11-08 |
| 公开（公告）号： | CN109402112A | 公开（公告）日： | 2019-03-01 |
| 发明（设计）人： | 龚炎长;骆薇;袁杨杨 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速、低成本从鸡血中分离PCR模板的方法，步骤是：A、从血样中分离血细胞核：向1.5mL EP管中加入新鲜、冷冻的抗凝鸡血样品，4000rpm离心1分钟去上清；向管中加入500μl灭菌水，静置1分钟，9500rpm离心3分钟，弃上清；B、裂解细胞核：使用剪去枪头尖部的枪头向沉淀中加入200μl灭菌水摇匀的3－4％螯合型离子交换树脂溶液，混匀后，55－57℃水浴30分钟，再放入干热仪，100℃加热8分钟；C、PCR模板分离：9500rpm离心2分钟，取上清作为PCR模板。该法所获取的PCR模板与现有的传统DNA提取方法获得模板在用于PCR技术检测具有同等功效，操作上更加简单易行、耗时短(1小时以内)、成本低(约0.31元/样)，适用于利用PCR技术进行的各种快速DNA分子检测实验。 | ||
| 搜索关键词： | 鸡血 低成本 灭菌水 枪头 螯合型离子交换树脂 细胞核 分离血细胞 分子检测 血样 快速DNA 放入 干热 混匀 尖部 剪去 抗凝 裂解 水浴 摇匀 加热 沉淀 耗时 冷冻 新鲜 检测 | ||
【主权项】：
1.一种快速、低成本从鸡血中分离PCR模板的方法，其步骤是：A、从血样中分离血细胞核：向1.5mL EP管中加入10－20μl新鲜、冷冻的抗凝鸡血样品，4000rpm离心1分钟去上清；向管中加入500μl灭菌水，静置一分钟，9500rpm离心2－4分钟，弃上清；B、裂解细胞核：使用剪去枪头尖部的枪头向沉淀中加入200μl灭菌水摇匀的3－4％螯合型离子交换树脂溶液，混匀后，55－57℃水浴30分钟，再放入干热仪，100℃加热8分钟；C、PCR模板分离：9500rpm离心2分钟，取上清作为PCR模板。
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